GB/T5413-19--1997前言木标准等同采用美国公职分析化学师协会(AOAC)方法。木系列标准从实施之日起，代替GB5413-85.木标准由中国轻工总会提出。木标准由全国乳品标准化中心归日。木标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。木标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻下业研究所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢(中国)投资服务有限公司。木标准主要起草人:张玉杰、工芸、杨金宝。中华人民共和国国家标准婴幼儿配方食品和乳粉GB/T5413-19-1997游离生物素的测定代甘CB5413-85Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren--ile亩erminationoffreebionincon宜ent1范围木标准规定了用微生物法测定游离生物素的方法。木标准适用于婴幼儿配方食品和乳粉中游离生物素的测定。2方法原理通过植物乳杆菌(肠d汉.‘t。护la:勿，.)生长情况来测定游离生物素含量。3试剂、菌种和培养基所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。3.1生物素:标准品。3.2乙醉:体积分数为50%.&3菌种:植物乳杆菌(Lactobactillusplantorum).&4培养墓&4.1乳酸杆菌琼脂培养基:光解陈I殆，屏母浸青殆，荀萄钟I飞，番茄汁10O.L,磷酸二氧钾跄，聚III梨糖单油酸酚Ig.琼脂I飞，燕馏水10OOmL,pH6.8士0.2(25)C).&4.2乳酸杆菌肉汤培养基:光解陈l5g,醉母浸青殆，葡萄械log,番茄汁lOOrnL.磷酸二氧钾翔，聚[h梨械单油酸酷18,蒸馏水10OOmL,pH6.8土0.2(2510.&4.3生物素测定用培养基:维生素测定用酪蛋白氨基酸I跑，浦萄糠49g,乙酸钠20g,L-耽氨酸0.饱,DL一色氨酸0.翱.硫酸腺1-1吟20.g,盐敌鸟III吟20mg,尿啥IQ2OFng,盐酸硫肢素2mg,核黄素2-g.烟酸Zmg,泛酸钙2mg,9酸毗哆N72-g,p-氨墓笨pp酸200pg,54酸氧二钾18,磷酸二氧钾Ig,硫酸镁0.4g,盆化钠20rng,硫酸亚铁20.gI硫酸锰20mgI加蒸馏水至I000,nL，pH6.7士0.1(25C).4仪器常用微生物实验室仪器及pH训.5制备5.1菌种的制备5.1.1液体培养基的制备吸取定量的墓础液体培养基，加入等里的燕馏水，舟个培养管分装IO.LI盖上盖,121℃灭菌1&nin.迅速将灭菌管冷却，避免颜色形成。贮于冰箱中。国家技术监普局1997-05-28批准1998-09-01实施GB/T541119-19975.1.2植物乳杆菌(L.d.b-W-pI-i-)贮备管的制备将所用的微生物菌种接种到2个以上琼脂培养塞试管内，在28-40℃之间选择一个恒定温度(士0.5,C)培养6-24h,完成后放入冰箱。在使用新的菌种用于一个测定时，要在1-2周内做几个继代转接。不要用保存一周以上的培...
