GB/T5413-31-1997自ii言本标准给出的是尿酶的定性测定方法，方法快速准确。本系列标准从实施之日起，代什GB5413-85}本标准由中国轻工总会提出。本标准由全国乳.异.标准化中心归口。本标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。本标准参加起草单位:R生部食.".V,UI生监督检验所、浙江省轻〔业研究所、哈尔滨森永乳.异.有限公司、雀巢(中国)投资服务有限公司。本标准主要起草人:王芸、殷晓红、房玉国、王克新。中华人民共和国国家标准婴幼儿配方食品和乳粉GB/T5413-31-1997W酶的定性检验代替OB5413-85Milkpovvderandformulafoodsforinfantandyoungchildren一心ualitativedetectionofureaseI范围本标准规定了服酶的定性检验方法。本标准适用于婴幼儿配方食.甘.和乳粉中服酶的定性检验。2方法原理IR酶在适当酸碱度和温度下，催化尿素转化成碳酸铰。If碳酸钱在碱性条件下形成氢氧化钱，与钠氏试剂中的碘化钾汞复盐作用形成棕色的碘化双汞钱。NH2(]ONH}+2H20丝竺(NH4)2CO3(NH4)2CO3+20H--C032-+2NH40HK,EH914〕+KOH+NH3--NH}Hg2l+KI+H20黄棕色沉淀3试P,Ii3.1尿素溶液:log压。3.2钨酸钠溶液:1009/L.3.3A石酸钾钠溶液:20g/L.3.4硫酸:体积分数5%.3.5中性缓冲液取下述磷酸氢几钠溶液61lml,I磷酸二氢钾溶液389mL，两种溶液混合均匀。3.5.1磷酸氢二钠溶液称取无水磷酸氢二钠9.47g,溶J--10OOmL蒸馏水中。3.5.2磷酸二氢钾溶液称取磷酸二氢钾9.07g,溶F-1000ML蒸馏水中。3.6钠氏试剂称取红色碘化7j}(Hg12)55g,碘化钾41.25g,溶I-250ml,蒸馏水中，溶解后，倒入I000ml,容量瓶中。再称取氢氧化钠14她溶于500ml,水中，溶解并冷却后，再缓慢地倒入上述1000ML的容量瓶中，加水至刻度，摇匀，倒入试剂瓶静置后，用上清液。4操作步骤4.1取IOML比色管甲、乙两支，各加入0.Ig样品'imL燕馏水。振摇0.5min(约100次)。然后各加国家技术监督局1997-05-28批准1998-09-01实施GB/T5413-31-1997入ImL中性缓冲溶液(3.5).4.2向甲竹(样品管)加入ImL尿素溶液(3.1)。再向乙管〔空自对照管)加入ImL蒸馏水，两管摇匀后，置于40℃水浴中保温20min.4.3从水浴中取出两管后，各加4mL蒸馏水，摇匀，再加ImL钨酸钠溶液(3.2),摇匀，加ImL硫酸溶液(3.4),摇匀，过滤备用。4.4取L述滤液2mL，分别注入二支25mL具塞的比色管中。各加入15mL水，IML酒石酸钾钠溶液(3.3),2niL钠氏试剂(3.6),M.后以蒸馏水定容罕25rnL,摇匀。观察结果。分析结果的表述分析结果按表1进行判断。农1结果的判断服醉定性表示符号显示精况强阳性++++砖红色混浊或M清液次强阳性十十+桔红色ig.清液阳性++深金黄色或黄色ig.清液弱阳性十淡黄色或微黄色ig.清液阴性样品管与空白对照管同色或更淡
