GB/T5413-14-1997自ii言本标准等效采用美国公职分析化学师协会(AOAC)方法，方法准确、灵敏度高。本系列标准从实施之日起，代件GB5413-85}本标准由中国轻工总会提出。本标准由全国乳品标准化中心归口。本标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢(中国)投资服务有限公司。本标准主要起草人:张玉杰、王芸、殷晓红、吕为群。中华人民共和国国家标准婴幼儿配方食品和乳粉GB/T5413-14-1997维生素B12的测定代替GB5413-85MilkpomAerandformulafoodsforinfantandyoungchildren一」XterminationofvitaminB12content范围本标准规定了用微生物法测定维生索B,:的方法。本标准适用」;婴幼儿配方食品和乳粉中维生索Bi:的测定。方法原理莱十曼氏乳酸杆菌(Lactobacillusleichmannii)对维生素B,:的存在具有极高灵敏性。利用这种特异性可定量测出样品中维生素1312的含量。试剂、菌种和培养基所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。3.1生R-A水:99/L.3.2乙醉:体积分数为25%.3.3无水磷酸氢二钠。3.4无水偏垂W.硫酸钠。3.5柠檬酸(含一个结品水)。3.6菌种:莱士曼氏乳酸杆菌(Lactobacillusleichmannii).3.了培养草.3.7.1乳酸杆菌琼脂培养A:光解陈15g,酵母is}膏5g,葡萄掂log，番茄汁lOOmL,磷酸二氢钾2g,聚w梨掂单油酸酷lg'琼脂log,蒸馏水10OOmL,pH6.8士0.2(25C).3.7.2乳酸杆菌肉汤培养A.:光解陈15g,酵母i}}膏5g,葡萄掂log，番茄汁IOOmL,磷酸二氢钾2g,聚di梨掂单油&AIhIg,蒸馏水l000mL,pH6-8士0.2(25C).3.7.3维生素B12测定用培养基:无维生素酸水解酪蛋白15g,葡萄糖40g，天门冬酸胺0.2g，柠檬酸钠20g，抗坏血酸4g,L-肤氨酸0.4g,DL一色氨酸0.4g,硫酸腺*11,吟20mg,盐酸鸟M,吟20ing，尿lrk咙20mg,黄嚓吟20ing，核黄索1mg,盐酸硫胺素lmg，生物素I印9，烟酸2mg,p-氨基苯甲酸2mg，泛酸钙1mg,盐酸毗哆醉4mgI盐酸毗哆醛4mgI盐酸毗哆胺80印9，叶酸20体91磷酸二氢钾Ig,磷酸氢几钾Ig,硫酸镁0.4rng,氯化钠20mg,硫酸W.铁20rngI硫酸锰20mg,聚L}梨掂单油(#fi'"2g,蒸馏水10OOmL,pH6.0士0.2(25℃).3.8维生索B12:标准品。国家技术监督局1997-05-28批准1998一09一01实施GB/T5413-14-1997仪器常用实验室仪器及:分光光度计。制备5.1菌种的制备5门-I将保存在直柱状乳酸杆菌琼脂培养ilt中的莱士曼氏乳酸杆菌接种到新的培养ilt中。培养后再转接一次，...
