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电泳技术[公众微信号:bioworlde].ppt电泳技术[公众微信号:bioworlde].ppt电泳技术[公众微信号:bioworlde].ppt电泳技术[公众微信号:bioworlde].ppt电泳技术[公众微信号:bioworlde].ppt
引言电泳的概念:带电物质在电场中向相反电极移动的现象称为电泳(electrophoresis)。电泳现象早在十九世纪初就已发现(1808年俄国物理学家Reŭss进行了世界上第一次电泳实验)。但电泳技术的广泛应用,则是在1937年用滤纸作为支持介质成功地进行纸电泳以后,特别是近几十年以来,电泳技术发展很快,各种类型的电泳技术相继诞生,在生物化学、医学、免疫学等领域得到了广泛应用。原则上按电泳的原理来分,可分为二类:自由界面电泳:又称移动界面电泳,是指在没有支持介质的溶液中进行的电泳。其装置复杂,价格昂贵,费时费力,不便于推广应用。区带电泳:是指有支持介质的电泳,待分离物质在支持介质上分离成若干区带。支持介质的作用主要是防止电泳过程中的对流和扩散,以使被分离的成分得到最大分辨率的分离。区带电泳由于采用的介质不同以及技术上的差异,又可分为不同的类型。电泳的分类引言淀粉凝胶电泳:多用于同工酶分析,凝胶铺厚些,可一层一层剥层分析(一板多测)。天然淀粉经加工处理即可使用,但孔径度可调性差,并且由于其批号之间的质量相差很大,很难得到重复的电泳结果,加之电泳时间长,操作麻烦,分辨率低,实验室中已很少使用。琼脂糖凝胶电泳:一般用于核酸的分离分析。琼脂糖凝胶孔径度较大,对大部分蛋白质只有很小的分子筛效应。聚丙烯酰胺凝胶电泳:可用于核酸和蛋白质的分离、纯化及检测。其分辨率较高。聚丙烯酰胺和琼脂糖是目前实验室最常用的支持介质引言引言•另外根据支持介质形状不同,区带电泳可分为:薄层电泳、板电泳、柱电泳。•据用途不同,可分为:分析电泳、制备电泳、定量、免疫电泳。第一节电泳的基本原理电泳是在电场的作用下而产生的物质运动,不同的物质在一定的电场强度下,由于所带电荷不同,因此受到的引力不同,向相反电极泳动速度不同进而达到分离目的。.电泳的基本原理在一定pH条件下,每一种分子都具有特定的电荷(种类和数量)、大小和形状,在一定时间内它们在相同电场中泳动速度不同,各自集中到特定的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原理。+-带电粒子在电场中的移动与:粒子大小有关,颗粒直径愈小愈快粒子的电荷有关,电荷愈多愈快粒子的形状有关,愈接近球形愈快迁移率还和下列因素有关:1.电场强度电场强度是指每厘米的电位降凝胶两端距离20厘米,电压降200伏特,电场强度为10伏特/厘米电场强度越高电泳速度越快2.溶...

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