中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5216—2020商品化试剂盒检测方法乳酸链球菌素方法一Commercialkitmethod—Nisin—TestMethodⅠICS67.050C532020-08-27发布2021-03-01实施中华人民共和国海关总署发布ISN/T5216—2020前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国乌鲁木齐海关、北京勤邦生物技术有限公司。本标准主要起草人：孟茹、周均、尚爽、罗琼、齐鑫、万宇平、梁振纲、高艳菲、牛娜。1SN/T5216—2020商品化试剂盒检测方法乳酸链球菌素方法一1范围本标准规定了食品中乳酸链球菌素的酶联免疫检测方法。本标准适用于检测含乳饮品及肉制品等食品中乳酸链球菌素A及乳酸链球菌素Z的含量。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1乳酸链球菌素nisin乳酸乳球菌发酵后提取而制得的食品添加剂乳酸链球菌素，是一种多肽物质，由34个氨基酸残基组成。用于食品添加剂的有NisinA和NisinZ两种类型：NisinA的分子式为C140H230O37N42S7，相对分子量为3354.35Da；NisinZ的分子式为C140H230O37N42S7，相对分子量为3330.31Da。两种类型的乳酸链球菌素分子结构在第27位的氨基酸不同，NisinA第27位氨基酸为组氨酸，NisinZ第27位氨基酸为天冬酰胺。4方法提要样品中的乳酸链球菌素和试剂盒中微孔条上预包被的抗原竞争乳酸链球菌素抗体，加入酶标二抗后，用底物显色液显色，样本吸光值与所含乳酸链球菌素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中乳酸链球菌素的含量。5材料和试剂除另外说明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。5.1乳酸链球菌素检测试剂盒。试剂盒评价参见SN/T2775，具体评价结果参见附录A。试剂盒组成如下：a）96孔酶标板：12条×8孔（包被偶联抗原）；2SN/T5216—2020b）乳酸链球菌素标准品：0mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、2.5mg/L、12.5mg/L、62.5mg/L；c）高浓度标准品：100mg/L；d）酶标记物浓缩液；e）抗体工作液；f）浓缩清洗液；g）样品提取液；h）显色液：底物A、底物B；i）终止液。试剂盒应在4℃～8℃避光条件下保存，溶解后的酶标记物应在-15℃条...
