分享
7+[Compatibility+Mode].pptx
下载文档

ID:5912

大小:3.49MB

页数:75页

格式:PPTX

时间:2023-01-04

收藏 分享赚钱
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,汇文网负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。
网站客服:3074922707
Compatibility+Mode Compatibility Mode
第一节 概述 一、食品中常见的肠道致病菌 沙门氏菌 志贺氏菌 大肠艾希氏菌 变形杆菌 耶尔森菌 二、生物学特性 1、形态与染色 均为革兰氏阴性杆菌,中等大小,无芽胞,多数具有周身鞭毛 能运动,志贺氏菌属无鞭毛无动力。2、培养和生化反应(1)、需氧或兼性厌氧,菌落中等大小,表面光滑,液体培 养基混浊生长。(2)、肠道致病菌一般不分解乳糖,而非致病菌多能分解乳 糖、葡萄糖产酸或产酸产气。(3)、可还原硝酸盐为亚硝酸盐。O抗原 也称菌体抗原,细胞壁脂肪糖,耐热100不 被破坏 H抗原 也称鞭毛抗原,鞭毛蛋白,不耐热,60 30可破坏 K抗原 也称表面抗原(荚膜抗原),多糖,具有阻抑 O抗原发生凝集的现象,加热6030可消除 抑阻作用 菌毛抗原 三、抗原类型 四、致病性(一)、致病物质 1、内毒素:能引起机体发热,白细胞减少,低血糖,血压降低,严重者休克。2、外毒素:对小肠粘膜细胞具有物殊毒害作用,引起 腹泻。(二)、所致病疾 1、伤寒和副伤寒 2、食物中毒 3、细菌性痢疾 五、微生物检验的基本程序 检样处理增菌培养分离培养 生化试验血清学鉴定报告 思考题 1、肠道致病菌具有哪些生物学特性?2、肠道致病菌具有哪些抗原?又称为什么?有 什么特点?3、写出肠道致病菌检验的基本程序 第二节、沙门氏菌检验 一、概况(一)沙门氏菌的发现与食物中毒 (二)沙门氏菌的命名 根据所致疾病命名 根据菌的发现地区命名 以发现者的名字命名(三)沙门氏菌的抵抗力 60 30可杀死(四)沙门氏菌的分类地位及定义 1、地位:是肠杆菌科、埃希氏菌族、沙门氏 菌属中的细菌 2、定义 是肠杆菌科中形态和培养特征,生化反应及 抗原结构相似,被O1噬菌体裂解的一群革兰 氏阴性杆菌。二、生物学特性(一)、形态与染色:革兰氏染色阴性,无荚膜,无芽胞,多数 有鞭毛,有动力,短小杆菌。(二)、培养特性 1、需 氧 或 兼 性 厌 氧,最 适 温 度 37,PH7.27.4。(沙门氏菌(红色)侵入人体细胞 2、对营养要求不高,在普通培养基生长良好,37,24h,能形成菌落中等大小,直径2 3mm,圆形或卵形,表面光滑湿润,无色半 透明,边缘整齐的菌落 3、在液体培养基中,呈均匀混浊性生长,无 菌膜。(三)、生化特性 1、发酵GLU(赖氨酸),甘露醇,山梨醇产酸产气 (伤寒鸡伤寒沙门氏菌少数不产气)2、不发酵乳糖,蔗糖,侧金黄花醇 3、多数产生H2S(+),不产靛基质(-),不分解尿 素(-),不产生乙酰甲基甲醇(VP)(-),4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐(+)5、在KCN培养基中生长(-),苯丙氨酸脱氨酸(-)(四)、抗原结构 主要两种:A、O抗原 B、H抗原 C、表面抗原(K抗原)D、菌毛抗原 2、O抗原(1)O抗原的表示方法 共有58种,用字母O和阿拉伯数字标记:O1、O2、O3、O4 如:伤寒杆菌:O9、O12(2)沙门氏菌的分群及表示方法 用大写字母及相关符号表示:A、B、C、D、E、F Z、O51 O63、O65 O67(3)沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原 A群-O2 B群-O4 C群-O6 C1群-O7、C3群-O8、C2群-O6 O8、C4群-O6 O7 O14 D群-O9 F群-O11 E群-O3 E2群-O3、O10族 E3群-O3、O15 E4群-O1、O3、O19 3、H抗原(鞭毛抗原)耐热性差:6015或酒精处理可破坏 沙门氏H抗原有两种:第1 相:特异相,用英文小写字母表示a、b、cz z1z55 第2相:非特异相,用阿拉伯数字表示1、2、3其 中也有用小写字母a、n、x等表示。4、表面抗原:沙门氏菌有三种:Vi、M、5抗原、K抗原 Vi抗原位于菌体的最表层,包围了O抗原,可阻碍O抗原的血清 学凝集试验。破坏Vi抗原:60 30,100 5 含有Vi 抗原的沙门氏菌:伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌 三、沙门氏菌食物中毒(一)、引起食物中毒最常见的沙门氏菌:鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌(二)、易引起沙门氏菌中毒的食品 肉、蛋、乳类食品 行业关注:美国两种花生酱含沙门氏菌(三)、中毒原因 1、食用病畜禽的肉制品食品 2、病畜禽、带菌人和动物使食品受污染 3、用不洁净水外理食品(四)、临床病状(所致病菌)1、肠热病:伤寒与副伤寒病,为慢性发热的菌血病。由伤寒与副伤寒菌引起,潜伏期720天 2、急性肠胃类:主要症状:头痛、发热、恶心、呕吐、腹泻、出冷汗、及全身不适,病程23天 3、败血病:高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起 四、微生物检验(一)、基本步骤(程序)检样增菌(前增菌)分离培养生化 试验初步鉴定血清学反应最后鉴定报告 1、前增菌:用无选择性的培养基使处于濒死状态的M 恢复活力;2、选择性增菌:使沙门氏菌优势繁殖,基它细菌变到 抑制;3、选择性平板分离培养:分离出所需的细菌;4、生化试验:鉴定分离出来的细菌是否符合所检项目 的细菌;5、血清学鉴定:进一步鉴定。(二)、检验操作关键点 1、增菌:使待检菌复壮,抑制杂菌生长,提高检出率。前增菌:用于加工过的食品,37,48h 或1824h,长有杂菌。增菌培养基:增菌液一般用MM和SC两种,如可能是伤寒沙门 氏菌用TTB,用42培养。2、平板分离 选择性培养基:BS、DHL、HE、WS、SS BS中最好,DHL、HE、WS很好,SS最差 一般要用:BS和WS/SS两个平板,BS主要用 于伤寒沙门氏菌的分离 BS上的菌落 DHL上的菌落 SS上的菌落 3、五项生化试验 H2S、靛基质、PH7.2尿素酶、KCN 、赖氨酸脱羧酶(1)三糖铁培养的培养 典型沙门氏菌在三糖铁培养上的特征:表面(-)粉红色、底层(+)黄色、H2S(+)底层有黑色、有动 力。在TSI培养基中:表面(+)黄色、H2S(-)的培养物可排除,其 它培养物均有可能是沙门氏菌。(2)其余四项生化实验 靛基质 PH7.2尿素酶 KCN 赖氨酸脱羧酶 反应序号:A1、A2多见,B1少见(3)、典型沙门氏菌的五项生化反应及其检验的利用 A、典型五项生化反应:A1 H2S(+)靛基质(-)PH7.2尿素酶(-)KCN(-)赖氨酸脱羧E(+)B、利用五项生化反应鉴定沙门氏菌的最简单方案 a、对于H2S阳性菌,利用五项生化反应试验可判别沙 门氏菌和柠檬酸杆菌。b、对于H2S阴性菌,查到B1时即:H2S(-)靛基质(-)PH7.2尿素酶(-)KCN(-)赖氨酸脱羧E(+),补做ONPE试验,可判定沙门 氏菌属和埃希氏菌属(ONPE(-)为沙门氏菌,ONPE(+)大肠艾希氏菌 5、血清学试验(最后鉴定)(1)、沙门氏菌诊断血清的种类:10种组合血清:主要用于伤寒和副伤寒沙门氏菌鉴 定 26种组合血清:常见致病菌的定群与分型 57种组合血清:常见定型,初步鉴定AF群以外 的菌型 144种组合血清:全套装(2)、血清学检验步骤 抗原准备 AF多价血清检验(判定是否是 沙门氏菌)群特异性抗体血清(如O2、O4、O3、O7、O8、O9、O10、O11(判定O 群别)O单因子血清检查 H因子血清检查(分型)报告 五、检验结果的报告 1、凡血清学鉴定与生化反应均符合者,报告 发现沙门氏菌。经检验,食品发现有沙门氏菌 2、凡血清学鉴定与生化反应均不符合者,报告未发现沙门氏菌。思考题:1、典型沙门氏菌的五项生化试验结果如何?2、沙门氏菌的形态特征,培养特性是什么?3、沙门氏菌检验时为什么要进行前增菌和增菌?4、沙门氏菌有哪些抗原?各有何特点?O、H抗 原如何表示,AF群沙门氏菌中,代表每群O 特异性抗原的独特因子是什么?5、沙门氏菌哪几个菌型具有Vi抗原,Vi抗原对O抗 原血清涟试验有何影响,对含Vi抗原菌,如何做O 抗原血清学试验。6、沙门氏菌在SS平板,TSI培养基上生长的现象如 何,说明其原理。7、分离纯化后怎样选用最少的生化试验方法初步鉴 定检验菌是否是沙门氏菌属的细菌。8、如何进行沙门氏菌的血清学试验。第三节、志贺氏菌的检验 一、生物学特性(一)、形态与染色 革兰氏阴性短杆菌、无荚膜,无芽胞,无鞭毛 23um*0.50.7um(二)、培养特性 1、需氧或兼氧性厌氧,最适温度37,PH7.27.4 2、在普通琼脂和SS平板上,能形成圆形、微凸、光滑湿润、无色半透明、边缘整齐、在中等大小 的菌落 3、宋氏志贺氏菌菌落较大,较不透明,粗糙而扁 平,在SS平板上可迟发酵乳糖,菌落呈玫瑰红色。4、在肉汤中呈均匀混浊生长,无菌膜。(三)、生化反应 1、发酵葡萄糖,产酸不产气,除宋氏志贺 氏菌外,均不发酵乳糖。2、不发酵侧金盏花醇、肌醇、水杨苷。3、不产生H2S,不分解尿素,V-P试验阴性,不能利用柠檬酸盐。4、甲基红阳性。(四)、抗原结构 1、抗原构成:O抗原:群特异性抗原:A、B、C、D K抗原:除B群外,一般有K抗原 2、志贺氏菌的分群与血清型 志贺氏菌分为四群:A群(痢疾志贺氏菌):110型 B群(福氏志贺氏菌):16型+X、Y两个变种,C群(鲍氏志贺氏菌):115型 D群(宋内氏志贺氏菌):1个型 菌 名 血 清 分 类 生 化 特 性 群 型 亚 型 甘露醇 鸟氨酸 脱羧酶 志贺氏菌 A 1 10 -福 氏 菌 B 16 x、y变种、3a、3b3 3b+-鲍 氏 菌 C 1 15+-宋内氏菌 D 1+志贺氏菌属抗原的分类 葡萄糖+甘露醇-甘露醇+乳糖-靛基质-靛基质+靛基质+乳糖+靛基质-靛基质-痢疾志贺 氏菌1、3、痢疾志 贺氏菌 福氏6型,鲍氏1、2、福氏痢疾菌(1、2、3、4、4、5、6、9、10型 2、7、8型 3、4、5、5型)鲍氏5、宋氏志 6、8、10、12、14型 7、9、11、13、贺氏菌 15型 3、属内外抗原关系(1)群内抗原关系:A群:2与10型,具有密切关系 C群:1与4和11型,10与11相关 B群:群抗原是B群各型之间的共同抗原(2)群间抗原关系:C群17型与A群3型相关 C群18型与A群11型相关(3)属外抗原关系:志贺氏菌与艾希氏菌属的O抗原关系 非常密切,除A群9型和D群宋氏菌与埃氏 希菌的O抗原关系未见报道外,每一个型 都与一定的艾希氏菌的O抗原有关。4、K抗原对O抗原血清学试验的影响 可阻碍O抗原的血清学凝集试验,煮沸 处理即可。(五)志贺氏菌的抵抗力 志贺氏菌属在外界环境中的生存力,以宋内氏最 强,福氏菌次之,志贺氏菌最弱。一般在潮湿土壤中能存活34天,37水中存活20 天,在粪便内(室温)存活11天。日光直接照射 30分钟,56-6010分即被杀死,对高温和化学消 毒剂很敏感,1%石炭酸中15-30分钟即被杀死,对 氯霉素、磺胺类、链霉素敏感,但易产生耐药性。二、志贺氏菌的致病性与食物中毒(一)流行病学 传染源 食物(含酱油的凉拌菜、色拉、生蔬 菜、乳制品、禽肉、水果、面包、汉堡包、鱼)、病人、粪便、苍蝇 等(二)志贺氏菌的致病性 致病因素:侵袭力、菌体内毒素、外毒素(二)临床症状 A、急性细菌性痢疾:急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢。B、慢性细菌性痢疾:慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型。三、微生物检验(一)检验步骤(程序)检样样品处理增菌培养SS、EMB平板分离培养初步生化鉴定最 后血清学鉴定报告 志 贺 氏 菌 检 测(二)检验操作要点 志贺氏菌在常温中生存的时间较短,应尽快进 行试验。如24h内不能检验,样品应在冰箱内 长时间不能检验,放在低温冰箱内。1、增菌培养 培养基:GN增菌液 在 361 68h,当 培 养 液 出 现轻微混浊即中止培养。2、分离培养 强选择性平板:SS或HE、WS 弱选择性平板:EMB或麦康数 在工作中361培养 1824h,菌落特征:无色透明,中等大小,光滑圆形菌落。发酵乳糖的某种肠杆菌 HE平板原理及反应 不发酵乳糖的某种肠道菌,而且产生 硫化氢,可能是沙门氏菌 不发酵乳糖的肠道菌,可能就是志 贺氏菌 SS平板原理及反应 SS Agar(Salmonella Shigella Agar)大肠杆菌或者别的发酵乳糖的

此文档下载收益归作者所有

下载文档
收起
展开