药物研究天麻素与薯蓣皂苷元配伍对大鼠缺氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用∗王志昊１ꎬ２ꎬ３ꎬ祝娜２ꎬ唐茂红２ꎬ付饶２ꎬ阿热依巴哈提２ꎬ李彦文４ꎬ黄秀兰２ꎬ李志勇１ꎬ２(１.中国中医科学院中药研究所ꎬ北京１００７００ꎻ２.中央民族大学药学院ꎬ北京１０００８１ꎻ３.山西中医药大学基础医学院ꎬ晋中０３０６１９ꎻ４.中国中医科学院中医药信息研究所ꎬ北京１００７００)摘要目的探讨天麻素(Ｇａｓ)、薯蓣皂苷元(Ｄｉｏ)及其组合物(ＧＤＣ)对大鼠缺氧损伤脑微血管内皮细胞(ＢＭＥＣｓ)的保护作用和对脑微血管新生的影响及其作用机制ꎮ方法将ＢＭＥＣｓ分为５组:正常对照组ꎬ模型对照组ꎬＧａｓ组(１、２、４、８、１６、３２μｍｏｌＬ－１)ꎬＤｉｏ组(０.２５、０.５、１、２、４、８μｍｏｌＬ－１)ꎬＧＤＣ组(Ｇａｓ和Ｄｉｏ浓度分别为１和０.２５、２和０.５、４和１、８和２、１６和４、３２和８μｍｏｌＬ－１)ꎮ分组给药１２ｈ后ꎬ对模型对照组、Ｇａｓ组、Ｄｉｏ组和ＧＤＣ组通过氧糖剥夺法建立ＢＭＥＣｓ缺氧模型ꎮ检测乳酸脱氢酶(ＬＤＨ)漏出率、白细胞介素１β(ＩＬ￣１β)含量、超氧化物歧化酶(ＳＯＤ)活力、丙二醛(ＭＤＡ)浓度ꎻ观察Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８、ＦＩＴＣ￣ＡｎｎｅｘｉｎＶ/ＰＩ染色ꎬ采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室实验、细胞划痕实验和小管形成实验ꎬ考察Ｇａｓ、Ｄｉｏ及ＧＤＣ对缺氧损伤ＢＭＥＣｓ的保护作用及促进血管新生作用ꎮ进一步利用网络药理学和分子对接方法研究ＧＤＣ抗脑缺血的作用机制ꎮ结果Ｇａｓ、Ｄｉｏ以２、０.５μｍｏｌＬ－１组合时ꎬ可显著提高缺氧损伤ＢＭＥＣｓ细胞活力(Ｐ<０.０５)ꎬ促进细胞增殖ꎻ与模型对照组比较ꎬＧａｓ组ＬＤＨ漏出率降低(Ｐ<０.０５)ꎻＧａｓ组、Ｄｉｏ组与ＧＤＣ组ＩＬ￣１β含量均显著下降(均Ｐ<０.０５)ꎬＧａｓ组、ＧＤＣ组ＳＯＤ活力升高(Ｐ<０.０５)ꎬＧａｓ组、Ｄｉｏ组以及ＧＤＣ组凋亡小体减少ꎮＧＤＣ可促进ＢＭＥＣｓ缺氧模型的增殖、侵袭、迁移以及小管形成ꎬ表明其在细胞水平上一定程度促进血管新生ꎮ网络药理学研究发现ꎬＧａｓ与半胱天冬酶３(ＣＡＳＰ３)、过氧化物酶体增生激活受体γ(ＰＰＡＲＧ)、凝血因子Ⅱ(Ｆ２)、基质金属蛋白酶￣９(ＭＭＰ￣９)、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Ａｋｔ)１蛋白具有良好的结合活性ꎬＤｉｏ与内皮一氧化氮合成酶(ＮＯＳ３)、ＫＤＲ蛋白具有良好的结合活性ꎬＧａｓ、Ｄｉｏ可能主要通过血管内皮生长因子...
