中华人民共和国国家标准GB4789.40—2016食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB4789.40—2016Ⅰ前言本标准代替GB4789.40—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》、SN/T1632.1—2013《出口奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)检验方法第1部分:分离与计数》。本标准与GB4789.40—2010相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验”;———修改了可疑菌落的挑取数量。GB4789.40—20161食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验1范围本标准规定了食品中克罗诺杆菌属(Cronobacter)的检验方法。本标准适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中克罗诺杆菌属的检验。2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1恒温培养箱:25℃±1℃,36℃±1℃,44℃±0.5℃。2.2冰箱:2℃~5℃。2.3恒温水浴箱:44℃±0.5℃。2.4天平:感量0.1g。2.5均质器。2.6振荡器。2.7无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。2.8无菌锥形瓶:容量100mL、200mL、2000mL。2.9无菌培养皿:直径90mm。2.10pH计或pH比色管或精密pH试纸。2.11全自动微生物生化鉴定系统。3培养基和试剂3.1缓冲蛋白胨水(bufferpeptonewater,BPW):见A.1。3.2改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(modifiedlaurylsulfatetryptosebroth-vancomycinmedium,mLST-Vm):见A.2。3.3阪崎肠杆菌显色培养基。3.4胰蛋白胨大豆琼脂(trypticasesoyagar,TSA):见A.3。3.5生化鉴定试剂盒。3.6氧化酶试剂:见A.4。3.7L-赖氨酸脱羧酶培养基:见A.5。3.8L-鸟氨酸脱羧酶培养基:见A.6。3.9L-精氨酸双水解酶培养基:见A.7。3.10糖类发酵培养基:见A.8。3.11西蒙氏柠檬酸盐培养基:见A.9。GB4789.40—20162第一法克罗诺杆菌属定性检验4检验程序克罗诺杆菌属检验程序见图1。图1克罗诺杆菌属检验程序5操作步骤5.1前增菌和增菌取检样100g(mL)置灭菌锥形瓶中,加入900mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水,用手缓缓地摇动至充分溶解,36℃±1℃培养18h±2h。移取1mL转种于10mLmLST-Vm肉汤,44℃±0.5℃培养24h±2h。5.2分离5.2.1轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物,各取增菌培养物1环,分别划线接种于两个阪崎肠杆菌显色培养基平板,显色培养基须符合GB4789.28的要求,36℃±1℃培养24h...
