电泳实验毛细管区带电泳（CZE）分离硝基酚位置异构体实验目的1.了解CZE分离的基本原理2.了解毛细管电泳仪的基本构造，掌握其基本操作技术3.学会计算CZE的重要参数基本理论毛细管电泳：毛细管电泳指以毛细管为通道、以高压直流电场为驱动力的一类液相分离分析技术。毛细管电泳装置组成高压源系统分离系统检测记录系统高压源系统的功能提供大小可变的直流电压电压显示窗启动高压按钮高压调节旋钮卸载高压按钮仪器电源开关电流显示窗毛细管高压源负极高压源正极高压源电极示意图分离系统的功能提供样品分离分析的通道和场所常用毛细管为石英玻璃毛细管石英玻璃缺点：质地脆、易折断聚酰亚胺涂层优点：增强毛细管韧性缺点：紫外光不透明（使用时需开检测窗口）分离系统详解石英玻璃毛细管直观示意图检测窗聚酰亚胺涂层的去除方法:1、浓硫酸溶解2、高温灼烧A石英玻璃毛细管内表面结构玻璃二氧化硅（SiO2)xSiOSiSiOSiSiOSiOSiOOOHHH毛细管的清洗氢氧化钠溶液二次水盐酸二次水经处理后石英玻璃毛细管内表面结构SiOSiSiOSiSiOSiOSiOOOHHHHHOHOHSi-OHpH>3Si-O-+H+硅羟基的电离当毛细管内充满水或电泳缓冲液时，会出现双电层：SiOSiSiOSiSiOSiOSiOOOOOH＋H＋H＋H＋H＋H＋H＋毛细管内液体SiOSiSiOSiSiOSiOSiOOOOOH＋H＋H＋Na+Na+Na+Na++-毛细管内液体电渗和电泳电渗流电渗电渗是一种液体相对于带电管壁移动的现象。水合离子引起的流体整体移动。（针对毛细管内液柱）电泳电泳是带电离子在电场作用下的定向移动。（针对带电离子）电渗是毛细管内液体及其中所有组分共有的现象，包括溶剂、各种溶质（带电离子与中性分子）电泳是毛细管内带电离子的特有现象，中性分子无电泳现象SiOSiSiOSiSiOSiOSiOOOOO+-Na+Cl-电渗电泳电泳迁移速度Na+Cl-矢量速度合速度Na+Cl-Na+Cl-检测记录系统实现对样品的检测与信号的记录氘灯毛细管卡盒光电倍增管实验内容间硝基苯酚对硝基苯酚毛细管电泳法分离硝基苯酚的电离O-NO2OHNO2+H+间硝基苯酚8.39对硝基苯酚pKapKa对<间电离后，硝基苯酚负电荷含量Q电量Q对>间硝基苯酚受电场作用力F电场力F对>间电泳速度对>间电渗速度不变合速度对<间出峰顺序：间、对分别在20kv/18kv/15kv三个电压下测试下面样品:硫脲、间硝基酚、对硝基酚混合样并根据实验结果计算电渗流速度、样品的电泳速度思考：为什么要测试样品硫脲？实验内容思考题1．如何计算间、对硝基苯酚的电泳速度？2．如何实现电渗流方向的改变？
