·技术与方法·生物技术通报BIOTECHNOLOGYBULLETIN2023,39(8):137-147收稿日期：2023-02-19基金项目：国家重点研发计划（2022YFD1300701），农业科技创新工程（cxgc-ias-16）作者简介：赵思佳，女，硕士研究生，研究方向：食品微生物；E-mail:sijia_zhao@163.com通讯作者：田健，男，博士，研究员，研究方向：蛋白分子设计；E-mail:tianjian@caas.cn；张杰，男，博士，研究方向：微生物代谢工程；E-mail:zhangjie09@caas.cn赤藓糖醇（erythritol）在自然界中分布广泛，是一种天然甜味剂、渗透保护剂。它存在于梨、葡萄等水果，蘑菇、甜菜等蔬菜，啤酒、清酒等饮料，酱油等发酵食品，海藻以及人和动物体液中［1］。赤代谢工程改造毕赤酵母生产赤藓糖醇赵思佳1王晓璐2孙纪录1田健2张杰2（1.河北农业大学食品科技学院，保定071000；2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室，北京100193）摘要：本研究旨在以毕赤酵母为底盘细胞构建赤藓糖醇生产菌株。通过调控糖酵解途径中磷酸果糖激酶基因pfk的表达，敲除副产物阿拉伯糖醇和核糖醇生产相关基因，过表达不同来源的4-磷酸赤藓糖磷酸化酶、赤藓糖还原酶和糖醇磷酸酶，构建毕赤酵母赤藓糖醇生产菌株，对过表达戊糖磷酸途径关键酶转酮酶（TKL）、磷酸核酮糖差向异构酶（RPE）及赤藓糖还原酶对赤藓糖醇产量的影响也进行了探究。结果表明，过表达酿酒酵母来源的糖醇磷酸酶基因pyp1及大肠杆菌来源的4-磷酸赤藓糖磷酸化酶基因yidA的工程菌株C8具有赤藓糖醇生产能力，摇瓶发酵产量为30mg/L；进一步过表达tkl和rpe后，菌株C10摇瓶发酵产量提高约40倍，达到1.2g/L，高密度发酵产量为10.6g/L；赤藓糖还原酶的过量表达并没有提升赤藓糖醇的产量，反而提高了副产物的产量。本研究首次在毕赤酵母中成功构建了赤藓糖醇合成通路，为改造毕赤酵母高效生产赤藓糖醇及其他高价值化合物奠定基础。关键词：赤藓糖醇；毕赤酵母；代谢工程；发酵DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2023-0138ModificationofPichiapastorisforErythritolProductionbyMetabolicEngineeringZHAOSi-jia1WANGXiao-lu2SUNJi-lu1TIANJian2ZHANGJie2（1.CollegeofFoodScienceandTechnology,HebeiAgriculturalUniversity,Baoding071000;2.StateKeyLaboratoryofAnimalNutrition,InstituteofAnimalScience,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100193）Abstract:Theaimofthisstudyistoconstructanerythritol-producingstr...
