附件6动物源性食品中喹诺酮类物质的快速检测胶体金免疫层析法(KJ201906)1范围本方法规定了动物源性食品中喹诺酮类物质的胶体金免疫层析快速检测方法。本方法适用于生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳、猪肉、猪肝、猪肾中洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、达氟沙星、二氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氟甲喹、噁喹酸残留的快速测定。2原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的喹诺酮类物质与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化，通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中喹诺酮类物质进行定性判定。3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。3.1试剂3.1.1乙腈。3.1.2甲酸。3.1.3分散固相萃取剂I：分别称取硫酸镁18g、醋酸钠4.5g放于研钵中研碎。3.1.4分散固相萃取剂II：分别称取硫酸镁27g、N-丙基乙二胺（PSA）4.5g放于研钵中研碎。3.1.5甲酸-乙腈溶液：98mL乙腈中加入2mL甲酸，混匀。3.1.6甲醇。3.1.7稀释液：脱脂奶粉︰水（1︰10）。3.2参考物质喹诺酮类参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1，纯度≥99%。表1喹诺酮类参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量序号中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子量1洛美沙星Lomefloxacin98079-51-7C17H19F2N3O3351.352培氟沙星Pefloxacin70458-92-3C17H20FN3O3333.363氧氟沙星Ofloxacin82419-36-1C18H20FN3O4361.374诺氟沙星Norfloxacin70458-96-7C16H18FN3O3319.335达氟沙星Danofloxacin112398-08-0C19H20FN3O3357.386二氟沙星Difloxacin5522-39-4C28H33N3F2449.587恩诺沙星Enrofloxacin93106-60-6C19H22FN3O3359.168环丙沙星Ciprofloxacin85721-33-1C17H18FN3O3331.139氟甲喹Flumequine42835-25-6C14H12FNO3261.2510噁喹酸OxolinicAcid14698-29-4C13H11NO5261.23注：或等同可溯源物质。3.3标准溶液的配制3.3.1喹诺酮类物质标准储备液（1mg/mL）：分别精密称取喹诺酮类参考物质（3.2）适量，置于50mL烧杯中，加入适量甲醇（3.1.6）超声溶解后，用甲醇转入10mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀，配制成浓度为1mg/mL的喹诺酮标准储备液。-20℃避光保存，有效期6个月。3.3.2喹诺酮类物质标准中间液（1μg/mL）：分别吸取喹诺酮类标准储备液（1mg/mL）（3.3.1）100μL于100mL容量瓶中，用甲醇（3.1.6）稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为1μg/mL...
