—1——附件3液体乳中黄曲霉毒素M1的快速检测胶体金免疫层析法（KJ201709）1范围本方法规定了牛奶、羊奶、牦牛奶等液体乳中黄曲霉毒素M1的胶体金免疫层析快速检测方法。本方法适用于生鲜乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳中黄曲霉毒素M1的快速测定。2原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的黄曲霉毒素M1与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中黄曲霉毒素M1进行定性判定。3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。3.1试剂甲醇。3.2参考物质黄曲霉毒素M1参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥90%。表1黄曲霉毒素M1参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量黄曲霉毒素M1AflatoxinM16795-23-9C17H12O7328.27注：或等同可溯源物质。3.3标准溶液的配制3.3.1黄曲霉毒素M1标准储备液（100μg/mL）：精密称取适量黄曲霉毒素M1标准品（3.2），置于10mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100μg/mL的黄曲霉毒素M1标准储备液；或可直接购买黄曲霉毒素M1标准储备液。-20℃避光保存备用，有效期3个月。—2——3.3.2黄曲霉毒素M1标准中间液（100ng/mL）：精密量取黄曲霉毒素M1标准储备液（100μg/mL）（3.3.1）0.1mL，置于100mL容量瓶中，用甲醇（3.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100ng/mL的黄曲霉毒素M1标准中间液。临用新制。3.4材料黄曲霉毒素M1胶体金免疫层析试剂盒，适用基质为液体乳。3.4.1金标微孔（含胶体金标记的特异性抗体）。3.4.2试纸条或检测卡。4仪器和设备4.1移液器：100µL、200µL和500µL。4.2涡旋混合器。4.3电子天平：感量为0.01g。4.4环境条件：温度15—35℃，湿度≤80%。5分析步骤5.1试样制备取适量有代表性样品充分混匀。5.2试样提取和净化以液体乳为基质的样品可直接上样检测或根据产品说明书稀释后检测。5.3测定步骤5.3.1试纸条与金标微孔测定步骤吸取100—200μL样品待测液于金标微孔（3.4.1）中，抽吸5—10次使混合均匀，不要有气泡，室温温育3—5min（根据配套说明书进行避光操作），将检测试纸条（3.4.2）样品端垂直向下插入金标微孔中，温育5—10min，从微孔中取出试纸条，进行结果判定。5.3.2检测卡与金标微孔测定步骤吸取10...
