DBS22吉林省地方标准DBS22/008—2012食品安全地方标准乳与乳制品中L-羟脯氨酸的测定2012-12-10发布2013-01-01实施吉林省卫生厅发布DBS22/008—2012I前言本标准的附录A为资料性附录。本标准起草单位：吉林省疾病预防控制中心。本标准主要起草人：李青、方赤光、刘思洁、张冠英、王蕴馨。DBS22/008—20121食品安全标准乳与乳制品中L-羟脯氨酸的测定1范围本标准规定了乳与乳制品中L-羟脯氨酸的分光光度、高效液相色谱、液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于乳与乳制品中L-羟脯氨酸的测定。本标准方法的检出限为：分光光度法为20mg/kg；高效液相色谱法为0.5mg/kg；液相色谱-串联质谱法为0.005mg/kg。第一法分光光度法2原理试样用硫酸水解，L-羟脯氨酸经氯胺T氧化后，与对二甲氨基甲醛反应生成红色化合物，在波长558nm处测定吸光度并与标准比较定量。3试剂和材料除另有说明外，所有试剂均为分析纯，实验用水为GB/T6682规定的三级水。3.1硫酸溶液[c(H2SO4)≈3mol/L]：取375mL水于1L量筒中,搅拌下缓慢加入160mL浓硫酸,冷却至室温后用水定容。3.2柠檬酸缓冲液(pH=6.8)：称取26.0g柠檬酸、14.0g氢氧化钠和78.0g无水乙酸钠,溶于500mL水,转入1L容量瓶中,加入250mL正丙醇,用水定容到刻度。3.3氯胺T溶液：称取1.41g氯胺T,用100mL缓冲溶液(4.2)溶解。临用现配。3.4显色剂：称取10.0g二甲氨基甲醛,用35mL高氯酸(60%质量分数)溶液或30mL高氯酸(70%质量分数)溶液溶解,缓慢加入65mL异丙醇。临用现配。3.5氢氧化钠溶液(200g/L)：称取100g氢氧化钠于500mL量筒中,搅拌下缓慢加水至400mL,冷却至室温后用水定容到500mL。3.6标准储备液：称取50mgL-羟脯氨酸标准品于100mL容量瓶中,用水溶解,加1滴硫酸溶液(4.1),用水定容至刻度。3.7标准使用液：移取5.00mL标准储备液至500mL容量瓶中用水定容至刻度。分别吸取该溶液10.00mL、20.00mL、25.00mL、40.00mL、50.00mL于100mL容量瓶中,用水定容至刻度,所得标准使用液浓度依次为0.5μg/mL、1.0μg/mL、1.25μg/mL、2.0μg/mL、2.5μg/mL。临用现配。4仪器和设备4.1紫外分光光度计。4.2分析天平：感量1mg。DBS22/008—201224.3酸度计。4.4恒温干燥箱。4.5恒温水浴锅。5分析步骤5.1试样制备取液体乳样10.0g(乳粉1.0g加水至10.0g左右)至100mL具塞比色管或具塞三角烧瓶中,加入30mL硫酸溶液,盖上塞子,置于恒温干燥箱中,105℃水解6h。5.2过滤趁热将水解产物用滤纸过滤至250mL容量瓶中,用10mL硫酸溶液分3次洗涤比色管或三角烧瓶和滤纸,...
