ICS65.020.01CCSB0115内蒙古自治区地方标准DB15/T2788—2022向日葵根尖染色体制片和核型分析技术规程Technicalcodeofpracticeforchromosomepreparationandkaryotypeanalysisofroottipofsunlower2022-08-30发布2022-09-30实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T2788—2022I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会(SAM/TC20)归口。本文件起草单位:内蒙古自治区农牧业科学院。本文件主要起草人:孙瑞芬、李素萍、于海峰、郭树春、张立华、孙峰成、乔慧蕾、聂惠、邵盈、牟英男、韩平安、聂利珍、牛素清、常悦、唐宽刚、梁晨、吴家瑗。DB15/T2788—20221向日葵根尖染色体制片和核型分析技术规程1范围本文件规定了向日葵根尖染色体玻片标本制备的仪器和设备、试剂配制、制备方法及核型分析方法。本文件适用于向日葵根尖染色体玻片标本制备和核型分析。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。染色体chromosome细胞内具有遗传性质的遗传物质深度压缩形成的聚合体,一般呈棒状,因易被碱性染料染色,故称染色体。随体satellite通过次缢痕与染色体主要部分相连,位于染色体末端的、圆形或椭圆形的染色体片段,称为随体。具随体的染色体称为随体染色体,用sat表示。核型karyotype染色体组在有丝分裂中期的表型,包括染色体数目、大小、形态等特征。核型分析karyotypeanalysis利用染色体制片对体细胞分裂中期的染色体直接进行观察、计数、分组,并对每个染色体形态特征进行定量和定性的描述,即为核型分析。4仪器和设备电子分析天平:精度0.001g。冰箱。DB15/T2788—20222恒温培养箱。光学显微镜(配有100倍油镜、成像系统)。5试剂配制0.002mol/L8-羟基喹啉称取0.0145g8-羟基喹啉于蒸馏水中,60℃水浴溶解后定溶至500mL。卡诺氏(Carnoy′s)固定液无水乙醇:冰醋酸=3:1(体积比),现用现配。1mol/L盐酸取比重1.19的盐酸82.5mL,用蒸馏水定溶至1000mL。改良卡宝品红染液A液:称取3g碱性品红,溶于100mL70%的乙醇,可以长期保存。B液:取10mLA液加入90mL5%苯酚水溶液,在37℃条件下温育2h~4h(限14d内使用)。卡宝品红染液:取B液45mL,加入6mL37%的甲醛,6mL冰乙酸,充分混匀(可长期保存)。改良卡宝品红染液:取10mL卡宝品红染液,加入45%的冰乙酸90mL和1.8g山梨醇,室温下放置...