ICS65.120B25DB12天津市地方标准DB12/T946—2020饲料中氨基酸的测定离子交换色谱法Determinationofaminoacidsinfeeds-Ionexchangechromatography2020-06-29发布2020-08-01实施天津市市场监督管理委员会发布DB12/T946—2020I前言本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农业农村委员会提出并归口。本标准起草单位：天津市畜牧兽医研究所。本标准主要起草人：杨鸿雁、梁世岳、李玉鹏、陈龙宾、范寰、乔家运。DB12/T946—20201饲料中氨基酸的测定离子交换色谱法1范围本标准规定了饲料中氨基酸的离子交换色谱法测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、样品的采集与制备、测定步骤和结果计算。本标准适用于饲料原料、配合饲料及浓缩饲料中氨基酸含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理3.1常规酸水解法饲料中的蛋白质在盐酸的作用下，水解成单一氨基酸，经离子交换色谱法分离并以茚三酮柱后衍生测定。水解中，色氨酸全部被破坏，不能测量，胱氨酸和蛋氨酸部分氧化，不能测准。3.2氧化酸解法将饲料蛋白中的含硫氨基酸（胱氨酸和蛋氨酸）用过甲酸氧化，使之转变为对酸稳定的氧化物，再通过酸水解法释放出来，经离子交换色谱法分离并以茚三酮柱后衍生测定。3.3碱水解法饲料中的蛋白质在碱的作用下，水解出色氨酸，经离子交换色谱法分离并以茚三酮柱后衍生测定。4试剂和材料4.1本标准所用试剂和水，在没有注明其它要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的一级水；所述溶液如未指明溶剂均系水溶液。试验中所需溶液、制剂及制品，在没有注明其它要求时均按GB/T603的规定制备。4.2盐酸：优级纯。4.3盐酸溶液（6mol/L）：量取盐酸500mL，用水稀释至1000mL，混匀。4.4茚三酮溶液：按仪器说明书配制或购买。4.5pH系列缓冲液、再生液：按仪器说明书配制或购买。DB12/T946—202024.6甲酸：浓度为88%。4.7过甲酸溶液：将30%过氧化氢与甲酸按体积比1:9混合，室温放置1h，置冰水浴中冷却30min,临用前配制。4.8盐酸溶液（7.2mol/L）：取盐酸600mL，用水稀释至1000mL，混匀。4.9氢氧化锂溶液（4mol/L）：称取一水合氢氧化锂167.8g，用水溶解并稀释至1000m...
