中华人民共和国国家标准GB4789.40—2010食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验NationalfoodsafetystandardFoodmicrobiologicalexamination:Enterobactersakazakii中华人民共和国卫生部发布2010-03-26发布2010-06-01实施GB4789.40—2010I前言本标准代替GB/T4789.40-2008《食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验》。本标准与GB/T4789.40-2008相比,主要变化如下:——修改了标准的中英文名称;——删除了附录A中A.3。本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:——GB/T4789.40-2008。GB4789.40—20101食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验1范围本标准规定了食品中阪崎肠杆菌(Enterobactersakazakii)的检验方法。本标准适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中阪崎肠杆菌的检验。2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1恒温培养箱:25℃±1℃,36℃±1℃,44℃±0.5℃。2.2冰箱:2℃~5℃。2.3恒温水浴箱:44℃±0.5℃。2.4天平:感量0.1g。2.5均质器。2.6振荡器。2.7无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。2.8无菌锥形瓶:容量100mL、200mL、2000mL。2.9无菌培养皿:直径90mm。2.10pH计或pH比色管或精密pH试纸。2.11全自动微生物生化鉴定系统。3培养基和试剂3.1缓冲蛋白胨水(bufferpeptonewater,BPW):见附录A中A.1。3.2改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(modifiedlaurylsulfatetryptosebroth-vancomycinmedium,mLST-Vm):见附录A中A.2。3.3阪崎肠杆菌显色培养基。3.4胰蛋白胨大豆琼脂(trypticasesoyagar,TSA):见附录A中A.3。3.5生化鉴定试剂盒。3.6氧化酶试剂:见附录A中A.4。3.7L-赖氨酸脱羧酶培养基:见附录A中A.5。GB4789.40—201023.8L-鸟氨酸脱羧酶培养基:见附录A中A.6。3.9L-精氨酸双水解酶培养基:见附录A中A.7。3.10糖类发酵培养基:见附录A中A.8。3.11西蒙氏柠檬酸盐培养基:见附录A中A.9。GB4789.40—201031mL+mLST-Vm10mL挑取疑似菌落第一法阪崎肠杆菌的检验4检验程序阪崎肠杆菌检验程序见图1。图1阪崎肠杆菌检验程序5操作步骤5.1前增菌和增菌取检样100g(mL)加入已预热至44℃装有900mL缓冲蛋白胨水的锥形瓶中,用手缓缓地摇动至充分溶解,36℃±1℃培养18h±2h。移取1mL转种于10mLmLST-Vm肉汤,44℃±0.5℃培养24h±2h。5.2分离5.2.1轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物,各取增菌培养物1环,分...