中华人民共和国国家标准GB5009.154—2016食品安全国家标准食品中维生素B6的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.154—2016Ⅰ前言本标准代替GB/T5009.154—2003《食品中维生素B6的测定》、GB5413.13—2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素B6的测定》。本标准与GB/T5009.154—2003相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品中维生素B6的测定”;———增加了高效液相色谱法。GB5009.154—20161食品安全国家标准食品中维生素B6的测定1范围本标准规定了食品中维生素B6的测定方法。本标准第一法为高效液相色谱法,适用于添加了维生素B6的食品测定;第二法为微生物法,适用于各类食品中维生素B6的测定。第一法高效液相色谱法2原理试样经提取等前处理后,经C18色谱柱分离,高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量测定维生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)的含量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1辛烷磺酸钠(C8H17NaO3S)。3.1.2冰乙酸(C2H4O2)。3.1.3三乙胺(C6H15N):色谱纯。3.1.4甲醇(CH4O):色谱纯。3.1.5盐酸(HCl)。3.1.6氢氧化钠(NaOH)。3.1.7淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。3.2试剂配制3.2.1盐酸溶液(5.0mol/L):量取45mL盐酸,用水稀释并定容至100mL。3.2.2盐酸溶液(0.1mol/L):吸取9mL盐酸,用水稀释并定容至1000mL。3.2.3氢氧化钠溶液(5.0mol/L):称取20g氢氧化钠,加50mL水溶解,冷却后,用水定容至100mL。3.2.4氢氧化钠溶液(0.1mol/L):称取0.4g氢氧化钠,加50mL水溶解,冷却后,用水定容至100mL。3.3标准品3.3.1盐酸吡哆醇(C8H12ClNO3,CAS号:58-56-0):纯度≥98%,或经国家认证并授予标准物质证书GB5009.154—20162的标准物质。3.3.2盐酸吡哆醛(C8H10ClNO3,CAS号:65-22-5):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。3.3.3双盐酸吡哆胺(C8H14Cl2N2O3,CAS号:524-36-7):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。3.4标准溶液配制3.4.1吡哆醇标准储备液(1mg/mL):准确称取60.8mg盐酸吡哆醇标准品,用0.1mol/L盐酸溶液溶解后定容到50mL,在-20℃下避光保存,有效期1个月。3.4.2吡哆醛标准储备液(1mg/mL):准确称取60.9mg盐酸吡哆醛标准品,用0.1mol/L盐酸溶液溶解后定容到50mL,在-20℃下避光保存,有效期1个月。3.4.3吡哆胺标准储备液(1mg/mL):准确称取71.7mg双盐酸吡哆胺标准品,用0.1mol/L盐...