中华人民共和国国家标准GB5009.224—2016食品安全国家标准大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定2016-08-31发布2017-03-01实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.224—2016Ⅰ前言本标准代替GB/T21498—2008《大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定》。本标准与GB/T21498—2008相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定”;———删除了原标准范围中“胰蛋白酶抑制剂活性可以用来表示豆制品的烘烤程度”;———修改了“原理”;———修改了“试剂和材料”;———删除了“采样”;———修改了“试样制备”;———删除了“测定次数”;———修改了“结果计算”;———修改了“精密度”;———删除了“检验报告”;———删除了附录B。GB5009.224—20161食品安全国家标准大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定1范围本标准规定了大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性(TIA)的测定方法。本标准适用于大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定。2原理胰蛋白酶可与苯甲酰-L-精氨酸-对硝基苯胺(L-BAPA)发生反应,生成对硝基苯胺,该物质在410nm下有特征吸收。大豆制品中的胰蛋白酶抑制剂可抑制此反应,使吸光度值下降,其下降程度与胰蛋白酶抑制活性成正比。采用分光光度计在410nm处测定该反应前后的吸光度值,可定量分析胰蛋白酶抑制剂活性。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂3.1.1盐酸(HCl)。3.1.2冰乙酸(CH3COOH)。3.1.3氢氧化钠(NaOH)。3.1.4氯化钙(CaCl2·2H2O)。3.1.5胰蛋白酶(Trypsin):-20℃冻藏。3.1.6苯甲酰-L-精氨酸-对硝基苯胺(L-BAPA)。3.1.7三羟甲基氨基甲烷[NH2C(CH2OH)3,Tris]。3.1.8二甲亚砜(C2H6OS,DMOS)。3.2试剂配制3.2.1盐酸溶液(6mol/L):取50mL盐酸(3.1.1)加入水中,用水稀释至100mL,混匀。3.2.2盐酸溶液(1mol/L):取83mL盐酸(3.1.1)加入水中,用水稀释至1000mL,混匀。3.2.3盐酸溶液(0.1mol/L):取8.3mL盐酸(3.1.1)加入水中,用水稀释至1000mL,混匀。3.2.4盐酸溶液(0.001mol/L):取1mL1mol/L盐酸溶液加入水中,用水稀释至1000mL,混匀。3.2.5乙酸溶液(5.3mol/L):取30mL冰乙酸(3.1.2)加入水中,用水稀释至100mL,混匀。3.2.6氢氧化钠溶液(0.01mol/L):称取0.40g氢氧化钠(3.1.3),溶于500mL水中,用水稀释至1000mL。3.2.7氯化钙盐酸溶液:称取0.735g氯化钙(3.1.4)溶解于1L0.001mol/L盐酸溶液中,用1mol/L盐酸溶液和0.1mol/L盐酸溶液调节pH至3.0±0.1。GB50...
