中华人民共和国国家标准GB5413.31—20132013-11-29发布2014-06-01实施食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定GB5413.31—2013I前言本标准代替GB/T5413.31—1997《婴幼儿配方食品和乳粉脲酶的定性检验》。本标准与GB/T5413.31—1997相比，主要变化如下：——修改了标准的名称；——增加了尿素溶液的贮存条件；——增加了纳氏试剂的贮存条件；——增加了判定结果的时限规定。GB5413.31—20131食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定1范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中脲酶的定性检验。2原理脲酶在适当酸碱度和温度条件下，催化尿素转化成碳酸铵。碳酸铵在碱性条件下生成氢氧化铵，与纳氏试剂中的碘化钾汞复盐作用生成棕色的碘化双汞铵。3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂3.1.1尿素（H2NCONH2）。3.1.2钨酸钠（Na2WO4·2H2O）。3.1.3酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O）。3.1.4硫酸（H2SO4）。3.1.5磷酸氢二钠（Na2HPO4）。3.1.6磷酸二氢钾（KH2PO4）。3.1.7碘化汞（HgI2）。3.1.8碘化钾（KI）。3.1.9氢氧化钠（NaOH）。3.2试剂配制3.2.1尿素溶液（10g/L）：称取尿素5g，溶解于500mL水中。保存于棕色试剂瓶中，冰箱中冷藏，有效期为1个月。3.2.2钨酸钠溶液（100g/L）：称取钨酸钠50g，溶解于500mL水中。3.2.3酒石酸钾钠溶液（20g/L）：称取酒石酸钾钠10g，溶解于500mL水中。3.2.4硫酸溶液（50mL/L）：吸取硫酸25mL，溶解于500mL水中。3.2.5磷酸氢二钠溶液：称取无水磷酸氢二钠9.47g，溶于1000mL水中。3.2.6磷酸二氢钾溶液：称取磷酸二氢钾9.07g，溶于1000mL水中。3.2.7中性缓冲溶液：取磷酸氢二钠溶液611mL，磷酸二氢钾溶液389mL，两种溶液混合均匀。3.2.8碘化汞-碘化钾混合溶液：称取红色碘化汞55g，碘化钾41.25g，溶于250mL水中。GB5413.31—201323.2.9纳氏试剂：称取氢氧化钠144g溶于500mL水中，充分溶解并冷却后，再缓慢地移入1000mL的容量瓶中，加入碘化汞-碘化钾混合溶液250mL，加水稀释至刻度，摇匀，转入试剂瓶内，静置后，用上清液。此试剂需棕色瓶保存，冰箱中冷藏，有效期为1个月。4仪器和设备4.1电子天平：感量为0.01g。4.2旋涡振荡器。4.3恒温水浴锅：40℃±1℃。5分析步骤取试管甲、乙两支，各称入0.10g试样，再吸入1mL水，振摇0.5min（约100次）。然后分别吸入1mL中性缓冲溶液。向甲管（样品管）吸入1mL尿素溶液，...
