中华人民共和国国家标准GB4789.10—2016食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB4789.10—2016Ⅰ前言本标准代替GB4789.10—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》、SN/T0172—2010《进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法》、SN/T2154—2008《进出口食品中凝固酶阳性葡萄球菌检测方法兔血浆纤维蛋白原琼脂培养基技术》。本标准与GB4789.10—2010相比,主要变化如下:———试验用增菌液统一为7.5%氯化钠肉汤。GB4789.10—20161食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验1范围本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的检验方法。本标准第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定性检验;第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数;第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低的食品中金黄色葡萄球菌的计数。2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1恒温培养箱:36℃±1℃。2.2冰箱:2℃~5℃。2.3恒温水浴箱:36℃~56℃。2.4天平:感量0.1g。2.5均质器。2.6振荡器。2.7无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。2.8无菌锥形瓶:容量100mL、500mL。2.9无菌培养皿:直径90mm。2.10涂布棒。2.11pH计或pH比色管或精密pH试纸。3培养基和试剂3.17.5%氯化钠肉汤:见A.1。3.2血琼脂平板:见A.2。3.3Baird-Parker琼脂平板:见A.3。3.4脑心浸出液肉汤(BHI):见A.4。3.5兔血浆:见A.5。3.6稀释液:磷酸盐缓冲液:见A.6。3.7营养琼脂小斜面:见A.7。3.8革兰氏染色液:见A.8。3.9无菌生理盐水:见A.9。第一法金黄色葡萄球菌定性检验4检验程序金黄色葡萄球菌定性检验程序见图1。GB4789.10—20162图1金黄色葡萄球菌检验程序5操作步骤5.1样品的处理称取25g样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤的无菌均质杯内,8000r/min~10000r/min均质1min~2min,或放入盛有225mL7.5%氯化钠肉汤无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min。若样品为液态,吸取25mL样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤的无菌锥形瓶(瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠)中,振荡混匀。5.2增菌将上述样品匀液于36℃±1℃培养18h~24h。金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长。5.3分离将增菌后的培养物,分别划线接种到Baird-Parker平板和血平板,血平板36℃±1℃培养18h~24h。Baird-Parker平板36℃±1...