中华人民共和国国家标准GB5009.222—2016食品安全国家标准食品中桔青霉素的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.222—2016Ⅰ前言本标准代替GB/T5009.222—2008《红曲类产品中桔青霉素的测定》、SN/T2426—2010《进出口粮谷中桔霉素含量检测方法液相色谱法》和SN/T2916—2011《出口食品中桔霉素的测定方法免疫亲和柱净化-高效液相色谱法》。本标准与GB/T5009.222—2008相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品中桔青霉素的测定”;———增加了净化步骤;———增加了适用范围。GB5009.222—20161食品安全国家标准食品中桔青霉素的测定1范围本标准规定了食品中桔青霉素的测定方法。本标准第一法适用于大米、玉米、辣椒、红曲类产品中桔青霉素的测定,第二法适用于大米、大麦、燕麦、小麦中桔青霉素的测定。第一法免疫亲和柱净化-高效液相色谱法2原理试样中的桔青霉素用甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释后,用免疫亲和柱净化,采用液相色谱结合荧光检测器测定桔青霉素的含量,外标法定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB6682规定的二级水。3.1试剂3.1.1甲醇(CH3OH):色谱纯。3.1.2乙腈(CH3CN):色谱纯。3.1.3磷酸(H3PO4):色谱纯。3.1.4冰乙酸(C2H4O2):色谱纯。3.1.5氢氧化钠(NaOH)。3.1.6吐温20(C58H114O26)。3.1.7氯化钠(NaCl)。3.1.8磷酸氢二钠(Na2HPO4)。3.1.9磷酸二氢钾(KH2PO4)。3.1.10氯化钾(KCl)。3.2试剂配制3.2.1氢氧化钠溶液(2mol/L):称取80.0g固体氢氧化钠,溶于1L水中。3.2.2磷酸溶液(10mmol/L,pH7.5):准确移取1.376mL磷酸加水定容至2000mL,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至7.5。3.2.3磷酸溶液(10mmol/L,pH2.5):准确移取1.376mL磷酸加水定容至2000mL,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至2.5。3.2.4PBS缓冲溶液:称取8.0g氯化钠、1.2g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2g氯化钾,用水溶解,GB5009.222—20162调节pH至7.0,用水定容至1000mL。3.2.50.1%吐温20-PBS溶液:准确移取1mL吐温20以PBS缓冲溶液定容至1000mL。3.2.60.1%磷酸溶液:准确移取1mL磷酸加水定容至1000mL。3.2.7洗脱液Ⅰ:甲醇-10mmol/L磷酸溶液(pH2.5)(70+30)。3.2.8洗脱液Ⅱ:甲醇-0.1%磷酸溶液(70+30)。3.3标准品桔青霉素(C13H14O5,CAS号:518-75-2),纯度≥99.0%。或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。3.4标准溶液配制3.4.1标准储备液:准确称取一定量的桔青霉素标...
