中华人民共和国国家标准GB5009.245—2016食品安全国家标准食品中聚葡萄糖的测定2016-08-31发布2017-03-01实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.245—20161食品安全国家标准食品中聚葡萄糖的测定1范围本标准规定了食品中聚葡萄糖的测定方法。本标准适用于食品中添加的聚葡萄糖的测定。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1聚葡萄糖[(C6H10O5)n]由葡萄糖、山梨糖醇和柠檬酸(或磷酸)按一定比例混合,在高温下加热聚合并精制、干燥而成的多聚体,平均聚合度12。属于可溶性膳食纤维。3原理食品中聚葡萄糖经热水浸提、超滤离心后,滤液经酶解去除淀粉、果聚糖等干扰物后,再用离子色谱-脉冲安培检测器定量测定聚葡萄糖含量。4试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。4.1试剂4.1.1氢氧化钠溶液(50%):色谱纯,离子色谱专用。4.1.2冰乙酸(CH3COOH)。4.1.3三水合乙酸钠(CH3COONa·3H2O)。4.1.4无水乙酸钠(CH3COONa)。4.1.5果聚糖酶(fructanase):≥2000U/mL。4.1.6淀粉葡糖苷酶(Amyloglucosidase):≥3260U/mL(可溶性淀粉);≥200U/mL(对硝基酚-β-麦芽糖苷,p-NP-βmaltoside)。4.1.7异淀粉酶(Isoamylase):≥1000U/mL。4.2试剂配制4.2.1乙酸溶液(0.2mol/L):准确吸取1.2mL冰乙酸,用水稀释至100mL。4.2.2乙酸钠溶液(0.2mol/L):准确称取2.72g三水合乙酸钠,用水溶解并稀释至100mL。4.2.3乙酸盐缓冲液(pH为4.5):将28mL乙酸溶液(0.2mol/L)与22mL乙酸钠溶液(0.2mol/L)混GB5009.245—20162合,用水稀释至100mL。4.2.4混合酶液:分别吸取680μL果聚糖酶、84μL淀粉葡糖苷酶、17μL异淀粉酶混合,加乙酸盐缓冲液稀释至20mL。混合酶液临用现配。4.3流动相4.3.1流动相A(含0.15mol/L氢氧化钠):准确吸取15.7mL氢氧化钠溶液(50%),用预先脱气的水稀释2L,惰性气体保护。4.3.2流动相B(含0.15mol/L氢氧化钠,0.50mol/L乙酸钠):准确称量41g无水乙酸钠(或68g三水合乙酸钠),用流动相A溶解定容至1L,混匀,过0.45μm膜,脱气。注:配制流动相时,去离子水需预先脱气0.5h,定容后的流动相混匀时倒置混匀5~6次,不可剧烈振摇。配好的流动相沿储液瓶壁缓缓倒入,脱气0.5h后惰性气体保护。4.4参考物质聚葡萄糖[(C6H10O5)n]:纯度大于90%,CAS:68424-04-4。注:为保证结果的准确性,如能确定添加的聚葡萄糖来源,应选用食品中添加的聚葡聚糖同源的参考物质,并达到FCC级。4.5参考物质溶液的配制4.5.1参考物质储备液(2.00mg/g):准确称取0.20g聚葡萄糖参...
