中华人民共和国国家标准GB5009.158—2016食品安全国家标准食品中维生素K1的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.158—2016Ⅰ前言本标准代替GB/T5009.158—2003《蔬菜中维生素K1的测定》和GB5413.10—2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素K1的测定》。本标准与GB/T5009.158—2003相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品中维生素K1的测定”;———增加了高效液相色谱-荧光检测法;———增加了液相色谱-串联质谱法;———删除了高效液相色谱-紫外检测法。GB5009.158—20161食品安全国家标准食品中维生素K1的测定1范围本标准规定了食品中维生素K1的测定方法。本标准第一法为高效液相色谱-荧光检测法,第二法为液相色谱-串联质谱法,均适用于各类配方食品、植物油、水果和蔬菜中维生素K1的测定。第一法高效液相色谱-荧光检测法2原理婴幼儿食品和乳品、植物油等样品经脂肪酶和淀粉酶酶解,正己烷提取样品中的维生素K1后,用C18液相色谱柱将维生素K1与其他杂质分离,锌柱柱后还原,荧光检测器检测,外标法定量。水果、蔬菜等低脂性植物样品,用异丙醇和正己烷提取其中的维生素K1,经中性氧化铝柱净化,去除叶绿素等干扰物质。用C18液相色谱柱将维生素K1与其他杂质分离,锌柱柱后还原,荧光检测器检测,外标法定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1无水乙醇(CH3CH2OH)。3.1.2碳酸钾(K2CO3)。3.1.3无水硫酸钠(Na2SO4)。3.1.4异丙醇(C3H8O)。3.1.5正己烷(C6H14)。3.1.6甲醇(CH3OH):色谱纯。3.1.7四氢呋喃(C4H8O):色谱纯。3.1.8乙酸乙酯(C4H8O2)。3.1.9冰乙酸(CH3COOH):色谱纯。3.1.10氯化锌(ZnCl2):色谱纯。3.1.11无水乙酸钠(CH3COONa)。3.1.12氢氧化钾(KOH)。3.1.13脂肪酶:酶活力≥700U/mg。3.1.14淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。3.1.15锌粉:粒径50μm~70μm。GB5009.158—201623.2试剂配制3.2.140%氢氧化钾溶液:称取20g氢氧化钾于100mL烧杯中,用20mL水溶解,冷却后,加水至50mL,储存于聚乙烯瓶中。3.2.2磷酸盐缓冲液(pH8.0):溶解54.0g磷酸二氢钾于300mL水中,用40%氢氧化钾溶液调节pH至8.0,加水至500mL。3.2.3正己烷-乙酸乙酯混合液(90+10):量取90mL正己烷,加入10mL乙酸乙酯,混匀。3.2.4流动相:量取甲醇900mL,四氢呋喃100mL,冰乙酸0.3mL,混匀后,加入氯化锌1.5g,无水乙酸钠0.5g,超声溶解后,用0.22μm有机系滤...
