中华人民共和国国家标准GB4789.35—2016食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB4789.35—2016Ⅰ前言本标准代替GB4789.35—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》、SN/T1941.1—2007《进出口食品中乳酸菌检验方法第1部分:分离与计数方法》。本标准与GB4789.35—2010相比,主要变化如下:———增加了乳酸菌总数计数培养条件的选择及结果说明;———修改了改良MRS培养基成分;———修改了平板计数的接种方法和接种量。GB4789.35—20161食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验1范围本标准规定了含乳酸菌食品中乳酸菌(lacticacidbacteria)的检验方法。本标准适用于含活性乳酸菌的食品中乳酸菌的检验。2术语和定义2.1乳酸菌lacticacidbacteria一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌的通称。本标准中乳酸菌主要为乳杆菌属(Lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)和嗜热链球菌属(Streptococcus)。3设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:3.1恒温培养箱:36℃±1℃。3.2冰箱:2℃~5℃。3.3均质器及无菌均质袋、均质杯或灭菌乳钵。3.4天平:感量0.01g。3.5无菌试管:18mm×180mm、15mm×100mm。3.6无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。3.7无菌锥形瓶:500mL、250mL。4培养基和试剂4.1生理盐水:见A.1。4.2MRS(ManRogosaSharpe)培养基及莫匹罗星锂盐(Li-Mupirocin)和半胱氨酸盐酸盐(CysteineHydrochloride)改良MRS培养基:见A.2和A.3。4.3MC培养基(ModifiedChalmers培养基):见A.4。4.40.5%蔗糖发酵管:见A.5。4.40.5%纤维二糖发酵管:见A.5。4.60.5%麦芽糖发酵管:见A.5。4.70.5%甘露醇发酵管:见A.5。4.80.5%水杨苷发酵管:见A.5。4.90.5%山梨醇发酵管:见A.5。4.100.5%乳糖发酵管:见A.5。GB4789.35—201624.11七叶苷发酵管:见A.6。4.12革兰氏染色液:见A.7。4.13莫匹罗星锂盐(Li-Mupirocin):化学纯。4.14半胱氨酸盐酸盐(CysteineHydrochloride):纯度>99%。5检验程序乳酸菌检验程序见图1。图1乳酸菌检验程序图6操作步骤6.1样品制备6.1.1样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。6.1.2冷冻样品可先使其在2℃~5℃条件下解冻,时间不超过18h,也可在温度不超过45℃的条件解冻,时间不超过15min。6.1.3固体和半固体食品:以无菌操作称取25g样品,置于装有225mL生理盐水的无菌均质杯内,于80...
