中华人民共和国国家标准GB4789.3—2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB4789.3—2016Ⅰ前言本标准代替GB4789.3—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》、GB/T4789.32—2002《食品卫生微生物学检验大肠菌群的快速检测》和SN/T0169—2010《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》大肠菌群计数部分。本标准与GB4789.3—2010相比,主要变化如下:———增加了检验原理;———修改了适用范围;———修改了典型菌落的形态描述;———修改了第二法平板菌落数的选择;———修改了第二法证实试验;———修改了第二法平板计数的报告。GB4789.3—20161食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数1范围本标准规定了食品中大肠菌群(Coliforms)计数的方法。本标准第一法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数;第二法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。2术语和定义2.1大肠菌群Coliforms在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。2.2最可能数Mostprobablenumber;MPN基于泊松分布的一种间接计数方法。3检验原理3.1MPN法MPN法是统计学和微生物学结合的一种定量检测法。待测样品经系列稀释并培养后,根据其未生长的最低稀释度与生长的最高稀释度,应用统计学概率论推算出待测样品中大肠菌群的最大可能数。3.2平板计数法大肠菌群在固体培养基中发酵乳糖产酸,在指示剂的作用下形成可计数的红色或紫色,带有或不带有沉淀环的菌落。4设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:4.1恒温培养箱:36℃±1℃。4.2冰箱:2℃~5℃。4.3恒温水浴箱:46℃±1℃。4.4天平:感量0.1g。4.5均质器。4.6振荡器。4.7无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。4.8无菌锥形瓶:容量500mL。4.9无菌培养皿:直径90mm。GB4789.3—201624.10pH计或pH比色管或精密pH试纸。4.11菌落计数器。5培养基和试剂5.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨(laurylsulfatetryptose,LST)肉汤:见A.1。5.2煌绿乳糖胆盐(brilliantgreenlactosebile,BGLB)肉汤:见A.2。5.3结晶紫中性红胆盐琼脂(violetredbileagar,VRBA):见A.3。5.4无菌磷酸盐缓冲液:见A.4。5.5无菌生理盐水:见A.5。5.61mol/LNaOH溶液:见A.6。5.71mol/LHCl溶液:见A.7。第一法大肠菌群MPN计数法6检验程序大肠菌群MP...
