中华人民共和国国家标准GB5009.255—2016食品安全国家标准食品中果聚糖的测定2016-08-31发布2017-03-01实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.255—20161食品安全国家标准食品中果聚糖的测定1范围本标准规定了食品中果聚糖含量的离子色谱法测定方法。本标准适用于乳及乳制品、婴幼儿配方食品、婴幼儿谷类辅助食品、固体饮料、配制酒中单独添加的低聚果糖、多聚果糖或菊粉含量的测定。2原理试样经热水浸提,样液中的蔗糖经蔗糖酶水解成葡萄糖和果糖,葡萄糖和果糖经硼氢化钠还原成相应的糖醇,多余的硼氢化钠用乙酸中和。样液中的果聚糖经过果聚糖酶水解成果糖和葡萄糖,经离子色谱-脉冲安培检测器测定果糖含量,通过换算系数,折算得到果聚糖的含量。3试剂和材料3.1试剂除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1.1氢氧化钠(NaOH)。3.1.2马来酸(C4H4O4)。3.1.3蔗糖酶:来源于酵母,酶活力≥300U。3.1.4硼氢化钠(NaBH4)。3.1.5冰乙酸(CH3COOH)。3.1.6三水乙酸钠(CH3COONa·3H2O)。3.1.7果聚糖酶:来源于黑曲霉,酶活力≥10000U。3.1.850%氢氧化钠溶液(NaOH):色谱纯。3.1.9无水乙酸钠(CH3COONa):纯度≥99.0%。3.1.10氮气(N2):纯度≥99.9%。3.2试剂配制3.2.1氢氧化钠溶液(1mol/L):称取40g氢氧化钠(精确至0.01g),溶于水并稀释至1000mL,室温下可放置2个月。3.2.2马来酸钠缓冲溶液(100mmol/L,pH6.5):称取1.16g马来酸(精确至0.01g)于150mL烧杯中,加入约70mL水溶解,用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH6.5,用水稀释至100mL。4℃保存,可放置3个月。3.2.3蔗糖酶溶液(4.5U/mL):将蔗糖酶(活力为300U)溶解于66mL马来酸钠缓冲溶液,分装到2mL的离心管中,-20℃保存,可放置6个月。使用前需测定酶活力。3.2.4氢氧化钠溶液(50mmol/L):称取2g氢氧化钠(精确至0.01g),溶于水并稀释至1000mL,室GB5009.255—20162温下可放置2个月。3.2.5硼氢化钠溶液(10mg/mL):准确称取适量硼氢化钠(精确至0.001g)于聚丙烯离心管中,用50mmol/L氢氧化钠溶液溶解,最终质量浓度为10mg/mL,用时现配。3.2.6乙酸溶液(200mmol/L):吸取0.6mL冰乙酸,用水稀释至50mL,4℃保存,可放置2个月。3.2.7乙酸钠溶液(200mmol/L):称取1.36g三水乙酸钠(精确至0.01g),溶于水并稀释至50mL,4℃保存,可放置2个月。3.2.8乙酸钠缓冲溶液(pH4.5):吸取14mL乙酸溶液和11mL乙酸钠溶液混合,并用水稀释至50mL,用时现配。3.2.9果聚糖酶溶液(455U/mL):将果聚糖酶(活力为10000U)溶解于22mL乙酸钠缓冲溶液...
