中华人民共和国国家标准GB28404—2012中华人民共和国卫生部发布2012-05-17发布2012-07-17实施食品安全国家标准保健食品中α-亚麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定GBGBGBGB28404—20121食品安全国家标准保健食品中α-亚麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定1范围本标准规定了保健食品中α-亚麻酸、二十碳五烯酸（简称EPA，下同）、二十二碳五烯酸（简称DPA，下同）和二十二碳六烯酸（简称DHA，下同）的气相色谱测定方法。本标准适用于保健品食品中α-亚麻酸、EPA、DPA、DHA的测定，不适用于以脂肪酸乙酯为有效成分的保健食品中α-亚麻酸、EPA、DPA、DHA的测定。2原理试样经酸水解后提取脂肪，其中α-亚麻酸、二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳五烯酸（DPA）、二十二碳六烯酸（DHA）经酯交换生成甲酯后，通过气相色谱分离检测，以保留时间定性，外标法定量。3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1氢氧化钾（KOH）。3.1.2盐酸（HCl）。3.1.3无水乙醚（C2H5OC2H5）。3.1.4乙醇（CH3CH2OH）：体积分数≥95％。3.1.5石油醚：沸程30℃～60℃。3.1.6正己烷（CH3(CH2)4CH3）：色谱纯。3.1.7甲醇（CH3OH）：色谱纯。3.1.8无水硫酸钠（Na2SO4）。3.2试剂配制氢氧化钾甲醇溶液（0.5mol/L）：称取2.8g氢氧化钾，用甲醇溶解并定容至100mL，混匀。3.3标准品3.3.1α-亚麻酸甲酯(C19H32O2)：纯度≥99.0％。3.3.2EPA甲酯(C21H32O2)：纯度≥98.5％。3.3.3DPA甲酯(C23H36O2)：纯度≥98.0％。3.3.4DHA甲酯(C23H34O2)：纯度≥98.5％。3.4标准溶液的配制GBGBGBGB28404—201223.4.1单个脂肪酸甲酯标准储备液(4.0mg/mL)：称取100.0mgα-亚麻酸甲酯、EPA甲酯、DPA甲酯、DHA甲酯标准物质于25.0mL容量瓶中，分别用正己烷溶解并定容至刻度，摇匀。此溶液应贮存于-18℃冰箱中。3.4.2脂肪酸甲酯混合标准中间液（1.0mg/mL）：分别吸取脂肪酸甲酯标准储备液2.50mL于10.0mL容量瓶中，摇匀，亦为标准曲线最高浓度，临用时配制。3.4.3脂肪酸甲酯标准工作液：分别吸取脂肪酸甲酯中间液0.40mL、0.80mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL于10.0mL容量瓶中，用正己烷定容，此浓度即为0.040mg/mL、0.080mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.40mg/mL的标准工作液，临用时配制。4仪器与设备4.1气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（FID）。4.2天平：感量为1mg和0.1mg。4.3旋转蒸发仪。4.4离心机：转速≥400...
