中华人民共和国国家标准GB4789.11-2014食品安全国家标准食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验2014-12-01发布2015-05-01实施GB4789.11—2014I前言本标准代替GB/T4789.11－2003《食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验》。本标准与GB/T4789.11－2003相比，主要变化如下：——修改了标准名称；——修改了范围；——增加了术语和定义；——修改了设备与材料；——修改了培养基与试剂；——删除了以无菌生理盐水稀释样品的步骤和杆菌肽敏感试验；——增加了触酶试验；——增加了附录A。GB4789.11—20141食品安全国家标准食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验1范围本标准规定了食品中β型溶血性链球菌（Streptococcus）的检验方法。本标准适用于食品中β型溶血性链球菌的检验。2术语和定义2.1β型溶血在菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。2.2β型溶血性链球菌能够产生β型溶血的化脓（或A群）链球菌（Streptococcuspyogenes）和无乳（或B群）链球菌（Streptococcusagalactiae）。3设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：a)恒温培养箱：36℃±1℃；b)冰箱：2℃～5℃；c)厌氧培养装置；d)天平：感量0.1g；e)均质器与配套均质袋；f)显微镜：10倍～100倍；g)无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头；h)无菌锥形瓶：容量100mL、200mL、2000mL；i)无菌培养皿：直径90mm；j)pH计或pH比色管或精密pH试纸；k)水浴装置：36℃±1℃；l)微生物生化鉴定系统。4培养基和试剂4.1改良胰蛋白胨大豆肉汤（Modifiedtryptonesoybeanbroth,mTSB）：见附录A中A.1。4.2哥伦比亚CNA血琼脂(ColumbiaCNAbloodagar)：见附录A中A.2。4.3哥伦比亚血琼脂(Columbiabloodagar)：见附录A中A.3。4.4革兰氏染色液：见附录A中A.4。4.5胰蛋白胨大豆肉汤（Tryptonesoybeanbroth,TSB）：见附录A中A.5。4.6草酸钾血浆：见附录A中A.6。GB4789.11—201424.70.25％氯化钙(CaCl2)溶液：见附录A中A.7。4.83％过氧化氢(H2O2)溶液：见附录A中A.8。4.9生化鉴定试剂盒或生化鉴定卡。5检验程序溶血性链球菌检验程序见图1。图1溶血性链球菌检验程序6操作步骤6.1样品处理及增菌按无菌操作称取检样25g（mL），加入盛有225mLmTSB的均质袋中，用拍击式均质器均质1min～2min；或加入盛有225mLmTSB的均质杯中，以8000r/min～10000r/min均质1min～2min。若样品为液态，振荡均匀即可。36℃±1℃培养18h～24h。6.2分离将增菌液划线接种于...
