中华人民共和国国家标准犌犅15193.5—2014食品安全国家标准哺乳动物红细胞微核试验20141224发布20150501实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布犌犅15193.5—2014Ⅰ前言本标准代替GB15193.5—2003《骨髓细胞微核试验》。本标准与GB15193.5—2003相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准哺乳动物红细胞微核试验”;———修改了范围;———增加了术语和定义;———增加了试验报告;———增加了试验的解释;———修改了试验目的和原理;———修改了实验动物;———修改了给予程序;———修改了标本制作;———修改了阅片的内容。犌犅15193.5—20141食品安全国家标准哺乳动物红细胞微核试验1范围本标准规定了哺乳动物红细胞微核试验的基本试验方法和技术要求。本标准适用于评价受试物的遗传毒性作用。2术语和定义2.1微核细胞有丝分裂后期染色体有规律地进入子细胞形成细胞核时,仍留在细胞质中的整条染色单体或染色体的无着丝断片或环。在末期单独形成一个或几个规则的次核,被包含在细胞的胞质内而形成。2.2着丝粒在细胞分裂期染色体与纺锤体纤维连接的区域,以使子染色体有序移动到子细胞两极。2.3正染红细胞成熟的红细胞,其缺乏核糖体并可用选择性核糖体染料与未成熟的嗜多染红细胞区分。2.4嗜多染红细胞未成熟的红细胞处于发育的中间期,仍含有核糖体,故可用选择性核糖体染料与成熟的正染红细胞区分。2.5总红细胞正染红细胞和嗜多染红细胞的总和。3试验目的和原理哺乳动物红细胞微核试验通过分析动物骨髓和(或)外周血红细胞,用于检测受试物引起的成熟红细胞染色体损伤或有丝分裂装置损伤,导致形成含有迟滞的染色体断片或整条染色体的微核。这种情况的出现通常是受到染色体断裂剂作用的结果。此外也可能在受到纺锤体毒物的作用时,主核未能形成代之以一组小核,此时小核比一般典型的微核稍大。4仪器和试剂4.1仪器解剖器械、生物显微镜、载玻片等。犌犅15193.5—201424.2试剂注:全部试剂除注明外均为分析纯,试验用水为蒸馏水。4.2.1小牛血清:小牛血清滤菌后放入56℃恒温水浴保温1h进行灭活。通常储存于4℃冰箱里。亦可用大、小鼠血清代替。4.2.2Giemsa染液:称取Giemsa染料3.8g,加入375mL甲醇研磨,待完全溶解后,再加入125m...