中华人民共和国国家标准GB4789.36—2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB4789.36—2016Ⅰ前言本标准代替GB/T4789.36—2008《食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》。本标准与GB/T4789.36—2008相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验”;———修改了标准的范围;———修改了设备和材料;———修改了培养基和生化反应的文字描述;———删除“第二法免疫磁珠捕获法的原理”;———删除“第三法全自动酶联荧光免疫分析仪筛选法”;———删除“第四法全自动病原菌检测系统筛选法”。GB4789.36—20161食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验1范围本标准规定了食品中大肠埃希氏菌O157:H7/NM(EscherichiacoliO157:H7/NM)的检验方法。本标准适用于食品中大肠埃希氏菌O157:H7/NM的检验。2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1恒温培养箱:36℃±1℃。2.2冰箱:2℃~5℃。2.3恒温水浴箱:46℃±1℃。2.4天平:感量0.1g、0.01g。2.5均质器。2.6显微镜:10倍~100倍。2.7无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或移液器及吸头。2.8无菌均质杯或无菌均质袋:容量500mL。2.9无菌培养皿:直径90mm。2.10pH计或精密pH试纸。2.11长波紫外光灯:365nm,功率≤6W。2.12微量离心管:1.5mL或2.0mL。2.13磁板、磁板架、样品混合器。2.14微生物鉴定系统。3培养基和试剂3.1改良EC肉汤(mEC+n):见A.1。3.2改良山梨醇麦康凯琼脂(CT-SMAC):见A.2。3.3三糖铁琼脂(TSI):见A.3。3.4营养琼脂:见A.4。3.5半固体琼脂:见A.5。3.6月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-MUG(MUG-LST):见A.6。3.7氧化酶试剂:见A.7。3.8革兰氏染色液:见A.8。3.9PBS-Tween20洗液:见A.9。3.10亚碲酸钾(AR级)。GB4789.36—201623.11头孢克肟(Cefixime)。3.12大肠埃希氏菌O157显色培养基。3.13大肠埃希氏菌O157和H7诊断血清或O157乳胶凝集试剂。3.14鉴定试剂盒。3.15抗-E.coliO157免疫磁珠。第一法常规培养法4检验程序大肠埃希氏菌O157:H7/NM常规培养法检验程序见图1。图1大肠埃希氏菌O157:H7/NM常规培养法检验程序5操作步骤5.1增菌以无菌操作取检样25g(或25mL)加入到含有225mLmEC+n肉汤的均质袋中,在拍击式均质器上连续均质1min~2min;或放入盛有225mLmEC+n肉...
