中华人民共和国国家标准犌犅5009.211—2022食品安全国家标准食品中叶酸的测定20220630发布20221230实施中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局发布犌犅5009.211—2022Ⅰ前言本标准代替GB5009.211—2014《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》。本标准与GB5009.211—2014相比,主要变化如下:———增加了微孔板测定方法;———修改了精密度要求;———修改了附录A。犌犅5009.211—20221食品安全国家标准食品中叶酸的测定1范围本标准规定了食品中叶酸的测定方法。本标准适用于食品中叶酸的测定。2原理叶酸是鼠李糖乳杆菌(犔犪犮狋狅犫犪犮犻犾犾狌狊狉犺犪犿狀狅狊狌狊)生长所必需的营养素。在一定控制条件下,将鼠李糖乳杆菌菌液接种至含有试样液的培养基中,培养一段时间后测定透光率(或吸光度值),在一定测定范围内可以根据叶酸含量与透光率(或吸光度值)的标准曲线计算出试样中叶酸的含量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水。3.1试剂3.1.1盐酸(HCl)。3.1.2氢氧化钠(NaOH)。3.1.3氯化钠(NaCl)。3.1.4十二水合磷酸钠(Na3PO4·12H2O)。3.1.5七水合磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)。3.1.6L抗坏血酸(C6H8O6)。3.1.7甲苯(C7H8)。3.1.8无水乙醇(C2H6O)。3.1.9鸡胰腺冻干粉:含γ谷胺酰基水解酶。3.1.10木瓜蛋白酶:酶活力≥5U/mg。3.1.11α淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。3.2试剂配制3.2.1磷酸盐缓冲液(0.05mol/L,pH6.8):分别称取4.35g十二水合磷酸钠和10.39g七水合磷酸氢二钠,加水溶解并定容至1L,混匀。加入2mL甲苯,室温保存。临用前按约5mg/mL的比例加入L抗坏血酸作为叶酸保护剂,调节pH至6.8±0.1。3.2.220%乙醇溶液(2+8):量取200mL无水乙醇与800mL水混匀。3.2.3氢氧化钠乙醇溶液(0.01mol/L):称取0.4g氢氧化钠,用20%乙醇溶液溶解并定容至1L,混匀。3.2.4氢氧化钠溶液(1mol/L):称取40g氢氧化钠,加水溶解并定容至1L,混匀。犌犅5009.211—202223.2.5盐酸浸泡液:量取...