第1页共3页医疗研究工程中期评价报告工程研究进展报告一、工程研究进展1、完成了酵母泥原料的预处理啤酒经发酵后回收的酵母，含有麦芽壳、酒花沉淀与析出蛋白质沉淀等物质，同时在酿造过程中，由于一些酒花及代谢产物吸附在酵母上，酵母呈淡咖啡色，带有苦味与令人不愉快的酵母味，对成品有不良影响。因此，在提取之前，酵母泥必须先经过洗涤、除杂、脱苦等处理。将废弃啤酒酵母泥用蒸馏水进行淘洗离心，至离心上清液根本无色为止，经处理后，啤酒酵母呈乳白色，色泽好，无苦味用玻璃称量皿称取一定质量的淘洗干净的酵母泥置于恒温烤箱中70℃烘烤枯燥至恒重，计算含水量。预处理工艺过程如下：啤酒废酵母→2-6℃水洗3-4次→沉淀酵母→加2倍体积5%酒石酸→离心→干净啤酒酵母。经处理后的啤酒酵母呈乳白色，色泽好，口尝无苦味。2、采用不同方法酵母细胞壁的破壁提取核酸的原理：酵母菌外层是厚达1.2μm的细胞壁，其化学成分是葡聚糖（30-40%）和甘露聚糖（30%），此外，脂类8.5-13.5%，蛋白质6-8%，还含有几丁质，酵母菌的葡聚糖，分子是为240000道尔顿，是一种分枝聚合物，葡聚糖与甘露糖之间由蛋白质维系起来。近2023%的甘露聚糖的侧链通过磷酸二酯键与磷酸边接，所有这些连接方式都使得酵母提取物首要的也是关键的是如何破坏细胞壁。本研究采用浓盐法、溶胀法和稀碱法。浓盐法：用高浓度盐溶液处理，同时加热，以改变细胞的通透性，使核酸从细胞内解放出来。食盐起到自溶促进剂，以及防腐与脱臭的作用。冷冻溶胀法：通过冷冻和加热引起细胞壁破坏的物理方法。它既不产生污染，又适合工业化生产。具体操作步骤是取适量啤酒酵母泥，投入预先搅动的等量沸水中，保持温度84℃，迅速参加液氮或碎冰，降温至25℃以下，啤酒酵母的细胞壁不能经受剧烈的迅速热胀冷缩而破碎，使细胞内的核酸游离出来。当温度降至25℃以下，在高倍显微镜下观察，90%以上的酵母细胞已破坏完全，能适用下一步核酸的提第2页共3页取别离。稀碱法：啤酒酵母的细胞壁主要由多糖组成，参加naoh溶液溶解多糖以破坏细胞壁，增加通透性，使核酸从细胞内溶出。具体操作步骤是取啤酒酵母泥适量，参加8倍体积的1%naoh溶液，于20℃以下反响1.5h，然后用6mol/l的hcl中和，核酸溶于水中。此方法中要注意碱的浓度和用量，8倍体积1%的氢氧化钠已足以使细胞壁大局部溶解，方便下一步的核酸提取，无需过浓和过量的碱，否那么不仅为后面的中和、提取带来大的工作量，而且反响过强，会引起核蛋白...
