第1页共87页第十三单元现代生物科技专题(选修3)第一讲基因工程考点一基因工程的操作工具1．限制性核酸内切酶(简称限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)作用：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)结果：产生黏性末端或平末端。2．DNA连接酶种类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体特点只缝合黏性末端缝合黏性末端和末端作用恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键3．载体(1)作用：携带外源DNA片段进入受体细胞。(2)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。(3)条件[基础自测]1．判断下列叙述的正误(1)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列(×)(2)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因(×)(3)限制酶只能用于切割目的基因(×)(4)DNA连接酶能将两碱基间通过氢键连接起来(×)(5)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶(×)(6)E·coliDNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端(×)(7)用于载体的质粒DNA分子上至少含一个限制酶识别位点(√)(8)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达(√)2．载体需具备的条件及其作用(连线)第2页共87页3．据两种限制酶的作用图示填空(1)已知限制酶EcoRⅠ和SmaⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓AATTC和CCC↓GGG，在图中画出两种限制酶切割DNA后产生的末端。(2)写出产生的末端的种类：①产生的是黏性末端；②产生的是平末端。(3)EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶识别的碱基序列不同，切割位点不同(填“相同”或“不同”)，说明限制酶具有专一性。4．学透教材、理清原因、规范答题用语专练(1)①是________酶，②是____________酶，二者的作用部位都是______________。(2)限制酶不切割自身DNA的原因：__________________________________________。答案：(1)限制DNA连接磷酸二酯键(2)自身DNA不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰第3页共87页1.与DNA有关的酶的比较名称作用部位作用底物作用结果限制酶磷酸二酯键DNA将DNA切成两个片段DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段将两个DNA片段连接为一个DNA分子DNA聚合酶或热稳定DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端DNA(水解)酶磷酸二酯键DNA将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸解旋酶碱基对之间的氢键DNA将双链DNA分子局部解旋为单链，形成两条长链RNA聚合酶磷酸二酯键核糖核苷酸将单...
