选修1第一部分微生物的利用考纲要求四年考情(1)大肠杆菌的培养和分离(2)分离以尿素为氮源的微生物2012浙江·非选择题考点一培养基及无菌技术1.培养基(1)概念:由适于微生物生长繁殖需要的各种营养物质人工配制而成的基质。划分标准种类特点用途按物理性质分固体培养基加入凝固剂，如琼脂、明胶、硅胶等常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面半固体培养基在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态可用于观察细菌的运动、鉴定菌种等方面液体培养基不加任何凝固剂常用于发酵工业和微生物扩大培养(2)类型:划分标准种类特点用途按用途分选择培养基根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基培养、分离特定的微生物鉴别培养基加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化的培养基鉴别不同类型的微生物(3)培养基的成分:包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。2.无菌技术(1)实验操作过程中，应从以下几个方面注意避免外来杂菌的污染:①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁、消毒。②将用于微生物培养的实验用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。(2)消毒和灭菌:项目消毒灭菌理化因素的作用强度较为温和强烈方法煮沸消毒法、化学药剂消毒、紫外线消毒灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌消灭微生物的数量部分生活状态的微生物全部微生物芽孢和孢子能否被消灭不能能【高考警示】不同器具选用的灭菌方法不同(1)接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法。(2)培养基、无菌水、玻璃器皿等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。(3)表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。考点二大肠杆菌的培养和分离1.培养和分离实验步骤步骤具体操作①培养基灭菌将50mLLB液体培养基、50mLLB固体培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌②倒平板在酒精灯火焰旁将固体培养基倒入4个灭菌的培养皿中，并水平放置使之形成平面步骤具体操作③接种在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，在摇床上37℃振荡培养12h④划线分离用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸取菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿⑤培养观察将培养皿倒置，放在37℃恒温箱中培养12h～24h后，可看到在划线的末端出现不连续的单个菌落2....
