山东医药2023年第63卷第25期骨髓间充质干细胞来源外泌体中lncRNASNHG12对心肌细胞的影响及其机制王德霞1，赵勇2，李荣1，辛辉11青岛大学附属医院心血管内科，山东青岛266000；2枣庄市山亭区人民医院心内科摘要：目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）来源外泌体中长链非编码RNA（lncRNA）小核仁RNA宿主基因12（SNHG12）对心肌细胞的影响及其机制。方法贴壁法分离培养BMSCs并传代。取传3代BMSCs，转染SNHG1248h，分离外泌体并鉴定。取H9c2细胞，随机分为阴性对照（NC）外泌体组与SNHG12外泌体组，分别转染NC外泌体、SNHG12外泌体；SNHG12外泌体+miR138-5p抑制剂组与SNHG12外泌体+NC抑制剂组，分别转染SNHG12外泌体+miR138-5p抑制剂及SNHG12外泌体+NC抑制剂；SNHG12外泌体+SH-NC组与SNHG12外泌体+SH-SIRT1组，分别转染SNHG12外泌体+SH-NC及SNHG12外泌体+SH-SIRT1。制备缺氧溶液，将上述各组细胞与缺氧溶液共孵育6h，建立体外缺氧细胞模型。收集各组细胞培养液，离心留取上清液。采用ELISA法检测上清液IL-1β、IL-18含量。收集各组细胞，采用Westernblotting法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、剪切的半胱氨酸蛋白酶1（Cleaved-Caspase-1）、剪切的焦孔素D（Cleaved-GSDMD）蛋白表达，采用CCK-8法检测细胞活力，采用TUNEL法检测细胞凋亡率。结果经鉴定，成功获取BMSCs来源外泌体。在体外缺氧细胞中，SNHG12外泌体组细胞凋亡率以及NLRP3、ASC、Cleaved-Caspase-1、Cleaved-GSDMD蛋白表达和上清液IL-1β、IL-18水平均低于NC外泌体组（P均<0.05），细胞活力高于NC外泌体组（P<0.05）。下调miR-138-5p表达后，BMSCs来源外泌体中SNHG12可导致NLRP3、ASC、Cleaved-Caspase-1、Cleaved-GSDMD蛋白表达降低，细胞活力升高、细胞凋亡率降低（P均<0.05）；下调SIRT1表达后，BMSCs来源外泌体中SNHG12可导致NLRP3、ASC、Cleaved-Caspase-1、Cleaved-GSDMD蛋白表达升高，细胞活力降低、细胞凋亡率升高（P均<0.05）。结论BMSCs来源外泌体中lncRNASNHG12可能通过调节miR-138-5p/SIRT1轴抑制心肌细胞炎症反应及心肌细胞焦亡和凋亡，从而发挥对心肌细胞的保护作用。关键词：心肌梗死；外泌体；骨髓间充质干细胞；长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因12doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.25.003中图分类号：R542.2文献标志码：A文章编号：1002-266X（2023）25-0009-05EffectoflncRNASNHG12inexosomesderivedfrombonemarrowmesenchymals...
