实验三菊花花瓣组织培养实验三菊花花瓣组织培养(一)实验目的(一)实验目的掌握菊花花瓣愈伤组织和不定芽的诱导,进一步掌握菊花花瓣愈伤组织和不定芽的诱导,进一步熟练无菌操作过程。熟练无菌操作过程。(二)实验原理(二)实验原理菊花是异质六倍体,遗传背景复杂,杂交后代性菊花是异质六倍体,遗传背景复杂,杂交后代性状分离严重,并且自交不亲和性高,所以通过自状分离严重,并且自交不亲和性高,所以通过自交获得自交系可能性极小,通过杂交培育菊花新交获得自交系可能性极小,通过杂交培育菊花新品种需要的时间也很长,因此,组培技术在菊花品种需要的时间也很长,因此,组培技术在菊花品种的改良等方面起着较为重要的作用。品种的改良等方面起着较为重要的作用。离体条件下,菊花花瓣能诱导出愈伤组织和不定离体条件下,菊花花瓣能诱导出愈伤组织和不定芽,然后再分化成完整植株,变异频率较高,选芽,然后再分化成完整植株,变异频率较高,选育效率高,是选育菊花新品种的良好手段。育效率高,是选育菊花新品种的良好手段。(三)实验材料和用具(三)实验材料和用具实验材料:实验材料:菊花花瓣菊花花瓣实验药品实验药品::MSMS、、1mg/mlNAA1mg/mlNAA、、1mg/ml2,4-D1mg/ml2,4-D、、1mg/ml6-BA1mg/ml6-BA、、1mol/LHCl1mol/LHCl、、1mol/LN1mol/LNaOHaOH、蒸馏水、灯用酒精、、蒸馏水、灯用酒精、7070%酒精、%酒精、22%次氯酸钠,吐温%次氯酸钠,吐温-80-80,无菌水。,无菌水。灭菌培养基:灭菌培养基:MS2MS2::MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAAMS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAAMS3MS3::MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAAMS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAAMS4MS4::MS+2.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAAMS+2.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAA实验用具:实验用具:天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三角瓶、天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三角瓶、pHpH试纸、电炉、高压灭菌锅。试纸、电炉、高压灭菌锅。无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、解剖刀、无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、滴管、记号笔、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。废液罐、火柴、光照培养箱。(四)实验步骤(四)实验步骤1.1.配制以下培养基各配制以下培养基各100ml100ml::MS5MS5::MS+1.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAAMS+1.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAAMS6MS6::MS+1.0mg/L6-BA+3.0mg/L2,4-DMS...