SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1181.2-2003口蹄疫病毒抗体检测方法微量血清中和试验Detectionantibodiesagainstfootandmouthdiseasevirus-Protocolofmicro-serumneutralizationtest2003-03-17发布2003-09-01实施中华人民共和匡国家质量监督检验检疫总肩SN/T1181.2-2003曰出...吝~月g青本标准根据采用OIE《诊断试验与疫苗标准手册》2000年第四版2.1.1章的相关内容起草。本标准的附录A、附录B是标准的资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国珠海出人境检验检疫局。本标准主要起草人:杨素、薛景山、吕宏、冯家望。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。SN/T1181.2-2003口蹄疫病毒抗体检测方法微量血清中和试验范围本标准规定了口蹄疫病毒微量血清中和试验方法。本标准适用于口蹄疫病毒中和抗体水平的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是往日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T6682-1992《分析实验室用水规格及试验方法》3缩略语下列缩略语适用于本标准。3.1CPE致细胞病变作用。3.2TCID50半数细胞感染量。3.3FMD口蹄疫。原理特异性的血清中和抗体与病毒结合后,能使病毒失去对敏感细胞的感染能力,从而阻止病毒的繁殖。这一反应不但表现为一种病毒只能被相应的免疫血清所中和,而且还表现在中和一定量的病毒,必须有一定效价的免疫血清。本标准规定的中和试验是以定量病毒稀释血清为基础,当血清能阻止定量病毒50%致细胞病变能力时,其血清的稀释度即为其效价。因而本中和试验是一种定量测定口蹄疫血清抗体的方法。5试剂和材料5.1本标准所用水应符合GB/T6682-1992中关于三级水(三蒸水)的规格。5.2本标准所用试剂配方参见附录Ae5.3本标准试剂除特殊规定外,均指分析纯试剂。5.4本标准所用试剂、玻璃器皿除有特殊规定外,均需高压灭菌。5.5病毒选用经蚀斑法纯化并经血清学鉴定的0,A,C,SATi,SAT2,SAT。和Asia1型口蹄疫细胞毒分别作为各型血清抗体检测的标准毒。1SN/T1181.2-20035.6标准血清:标准阴性血清采用无口蹄疫病毒抗体的猪血清或牛血清,标准阳性血清采用口蹄疫病毒感染发病21d的康复猪血清或牛血清。5.7细胞系:IB-Rs-2或BHK-21细胞系。5.8细胞培养基:含10%无...