食品补充检验方法犅犑犛２０２００９小麦粉中间苯二酚的测定高效液相色谱法２０２０１１１９发布国家市场监督管理总局发布小麦粉中间苯二酚的测定高效液相色谱法１范围本方法规定了小麦粉中间苯二酚含量的液相色谱测定方法。本方法适用于小麦粉中间苯二酚的测定。２原理试样中的间苯二酚经甲醇提取，蛋白沉淀剂沉淀，采用液相色谱Ｃ１８Ａｍｉｄｅ柱分离，荧光检测器检测，外标法定量。３试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为符合ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。３．１试剂３．１．１甲醇（ＣＨ３ＯＨ）：色谱纯。３．１．２亚铁氰化钾［Ｋ４Ｆｅ（ＣＮ）６·３Ｈ２Ｏ］。３．１．３乙酸锌［Ｚｎ（ＣＨ３ＣＯＯ）２·２Ｈ２Ｏ］。３．１．４冰醋酸（ＣＨ３ＣＯＯＨ）。３．２试剂配制３．２．１亚铁氰化钾溶液（９２ｇ／Ｌ）：称取１０６ｇ亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水定容至１０００ｍＬ。３．２．２乙酸锌溶液（１８３ｇ／Ｌ）：称取２２０ｇ乙酸锌溶于少量水中，加入３０ｍＬ冰醋酸，用水定容至１０００ｍＬ。３．３标准品３．３．１间苯二酚标准品（Ｃ６Ｈ６Ｏ２，ＣＡＳ号：１０８４６３，相对分子质量１１０．００）或经认证并授予标准物质证书的标准物质。３．４标准溶液的配制３．４．１间苯二酚标准储备液（１．００ｍｇ／ｍＬ）：准确称取间苯二酚标准品（３．３．１）１０ｍｇ（精确至０．１ｍｇ），用甲醇（３．１．１）溶解，配制成质量浓度为１．００ｍｇ／ｍＬ标准储备液，－１８℃避光保存，不超过２周。３．４．２标准中间液：准确移取１．００ｍＬ间苯二酚标准储备液（３．４．１）于１０ｍＬ和１００ｍＬ容量瓶中，用甲醇（３．１．１）稀释至刻度，摇匀，制备质量浓度为１００μｇ／ｍＬ和１０．０μｇ／ｍＬ的标准中间液。临用现配。３．４．３标准工作溶液：吸取间苯二酚标准中间液（３．４．２），用甲醇（３．１．１）稀释成质量浓度分别为０．０１００μｇ／ｍＬ、０．０２００μｇ／ｍＬ、０．１００μｇ／ｍＬ、０．５００μｇ／ｍＬ、１．００μｇ／ｍＬ、５．００μｇ／ｍＬ、１０．０μｇ／ｍＬ标准工作溶液。临用现配。１犅犑犛２０２００９３．５材料３．５．１微孔滤膜：有机相，孔径０．２２μｍ。３．５．２比色管：２５ｍＬ。４仪器和设备４．１高效液相色谱仪，配荧光检测器。４．２电子天平：感量分别为０．１ｍｇ和０．００１ｇ。４．３涡漩振荡器。４．４超声波清洗器...
