2016-11-28发布2017-01-01实施DBS13河北省地方标准DBS13/004—2016食品安全地方标准创伤弧菌检验河北省卫生和计划生育委员会发布DBS13/004—20162前言本标准按照GB/T1.1-2009规定的格式编写。本标准附录A为规范性附录。本标准由河北省卫生和计划生育委员会归口。本标准于2016年11月28日首次发布。ⅠDBS13/004—20161食品安全地方标准创伤弧菌检验1范围本标准规定了水产品中创伤弧菌（Vibriovulnificus）的检验方法。本标准适用于水产品中创伤弧菌的检验。2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：2.1恒温培养箱：36℃±1℃、39.5℃±0.5℃；2.2冰箱：2℃～5℃、7℃～10℃；2.3恒温水浴箱：45℃±1℃；2.4均质器或无菌乳钵；2.5天平：感量0.1g；2.6无菌试管：18mm×180mm、15mm×100mm；2.7无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头；2.8无菌锥形瓶：容量250mL、500mL、1000mL；2.9无菌培养皿：直径90mm；2.10无菌手术剪、镊子等；2.11全自动微生物生化鉴定系统。3培养基和试剂3.13％氯化钠碱性蛋白胨水：见附录A中A.1。3.2改良纤维二糖-多粘菌素B-多粘菌素E（mCPC）琼脂：见附录A中A.2。3.3纤维二糖-多粘菌素E（CC）琼脂：见附录A中A.3。3.43％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂：见附录A中A.4。3.53％氯化钠三糖铁琼脂：见附录A中A.5。3.6嗜盐性试验培养基：见附录A中A.6。DBS13/004—201623.73％氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基：见附录A中A.7。3.83％氯化钠MR-VP培养基：见附录A中A.8。3.93％氯化钠溶液：见附录A中A.9。3.10氧化酶试剂：见附录A中A.10。3.11革兰氏染色液：见附录A中A.11。3.12邻硝基酚-β-D-半乳糖苷（ONPG）试剂：见附录A中A.12。3.13Voges-Proskauer（V-P）试剂：见附录A中A.13。3.14生化鉴定试剂盒。4检验程序创伤弧菌检验程序见图１。图1创伤弧菌检验程序5操作步骤5.1样品制备生化试验或选用生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统筛选试验氧化酶试验，革兰氏染色，3%氯化钠三糖铁琼脂，嗜盐性试验mCPC或CC平板样品25g（mL）+225mL3%氯化钠碱性蛋白胨水挑取可疑菌落，接种于3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂结果报告36℃±1℃，18h～24h39℃～40℃，18h～24h36℃±1℃，18h～24hDBS13/004—201635.1.1非冷冻样品采集后应立即置7℃～10℃冰箱保存，尽可能及早检验；冷冻样品应在45℃以下不超过15min或在2℃～5℃不超过18h解冻。5.1.2鱼类和头足类动物取表面组织、肠或鳃。贝类取全...
