ICS65.120B54备案号：浙江省地方标准DB33DB33DB33DB33DB33/T745—2009饲料中甲基睾丸酮的测定高效液相色谱法DeterminationofMethyltestosteroneinFeedsHighPerformanceLiquidchromatography2009-04-07发布2009-05-07实施浙江省质量技术监督局发布食品伙伴网http://www.foodmate.netDB33/T745—2009I前言本标准附录A为资料性附录。本标准由浙江省海洋与渔业局提出并归口。本标准起草单位：浙江省水产质量检测中心。本标准主要起草人：王扬、叶磊海、宋琍琍、张海琪、郑重莺、马文俊、何丰。食品伙伴网http://www.foodmate.netDB33/T745—20091饲料中甲基睾丸酮的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了饲料中甲基睾丸酮的液相色谱测定方法。本标准适用于配合饲料中甲基睾丸酮的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样3原理用甲醇水溶液提取饲料中甲基睾丸酮，石油醚脱脂，固相萃取柱净化，高效液相色谱法检测，外标法定量。4试剂与材料本标准所用试剂，除特别注明外，均为分析纯试剂。实验用水应符合GB/T6682中二级水标准。4.1甲醇：色谱纯。4.2石油醚。4.3磷酸。4.495％甲醇溶液：准确量取95mL甲醇（4.1）和5mL水，将水加入甲醇搅拌混匀。4.5磷酸水溶液：准确量取1mL磷酸和600mL水，将磷酸加入水搅拌混匀。4.6甲基睾丸酮（Ｃ20Ｈ30Ｏ2）：已知质量分数≥99.0%。4.7标准储备液：精确称取甲基睾丸酮0.0100g，用甲醇溶解配制成1.0mg/mL的标准贮备液。-4℃保存。有效期6个月。4.8标准工作液：临用时，分别用流动相稀释成各质量浓度的标准溶液。4.9中性氧化铝固相萃取柱：3mL，500mg。4.10滤膜：四氟乙烯膜，孔径0.45μm。5仪器与设备5.1液相色谱仪：配紫外检测器。5.2电子分析天平：感量0.01g和0.0001g。5.3标准筛：孔径1mm。5.4恒温振荡器。5.5离心机：5000r/min。5.6氮气吹干仪。5.7固相萃取装置。5.8旋涡混匀器。食品伙伴网http://www.foodmate.netDB33/T745—200925.9聚丙烯离心管：50mL。5.10玻璃离心管：10mL。6色谱条件6.1色谱柱：C18，5μm，250mm×4.6mm（i.d.）。6.2柱温：30℃。6.3流动相：φ甲醇＋磷酸水溶液（4.5）＝72＋28。...
