ICS65.020.30B44DB12天津市地方标准DB12/T863—2019水产微生态制剂解淀粉芽胞杆菌生产技术规程Aquaticprobiotics---TechnicalregulationforproductionofBacillusamyloliquefaciens2019-01-14发布2019-02-15实施天津市市场监督管理委员会发布DB12/T863—2019I前言本标准依据GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》的要求起草。本标准由天津市农业科学院提出并归口。本标准起草单位:天津市农业生物技术研究中心。本标准主要起草人:谢凤行、张峰峰、周可、赵琼、赵玉洁、孙海波、高宝山。DB12/T863—20191水产微生态制剂解淀粉芽胞杆菌生产技术规程1范围本标准规定了解淀粉芽胞杆菌生产中所涉及的生产环境和设备、生产技术流程、质量检测和储运。本标准适用于水产微生态制剂解淀粉芽胞杆菌的生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB3095环境空气质量标准GB3838地表水环境质量标准GB20287农用微生物菌剂GB/T26428饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1解淀粉芽胞杆菌bacillusamyloliquefaciens属于芽胞杆菌科,芽胞杆菌属,杆状,有鞭毛,革兰氏阳性菌,芽胞椭圆形,中生或近中生。3.2原菌种theoriginalstrain由单菌落分离纯化,并在固体斜面上繁殖保存的菌种。3.3一级菌种firstclassstrain原菌种在培养皿上活化,挑取单菌落接种至三角瓶中,振荡培养的菌种。3.4二级菌种secondclassstrain三角瓶中的菌种接种至种子罐中,在种子罐中放大培养的菌种。4生产环境和设备要求4.1生产环境4.1.1厂区空气质量符合大气环境质量标准GB3095中Ⅱ类要求。4.1.2发酵用水符合地表水环境质量标准GB3838中Ⅲ类水质要求,冷却水及其他用水符合该标准中Ⅳ类水质要求。4.1.3生产车间配备消毒灭菌设施,菌种储藏室和无菌操作间与生产车间分开。DB12/T863—201924.2生产设备生产设备需为不锈钢发酵罐,体积根据生产规模自定。5生产技术流程5.1生产流程生产技术流程见附录A5.2菌种质量5.2.1用于发酵的菌种应有菌种鉴定报告或菌株来源相关信息。5.2.2在发酵前应先检测菌种的纯度和性能,如不纯或退化,应先进行提纯复壮。5.2.3菌种在上罐生产之前需检测种子罐中菌体的纯度和浓度,不能有杂菌污染,浓度达到每毫升亿级以上。5.3培养基5.3.1原菌种和一级菌种的...