ICS65.120B46DB37山东省地方标准DB37/T2617—2014饲料中黄曲霉毒素B1的测定高效液相色谱法2014-10-13发布2014-11-10实施山东省质量技术监督局发布DB37/T2617—2014I前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省农业厅提出。本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所。本标准主要起草人：滕葳、赵善仓、张树秋、郭长英、邓立刚、李增梅、王磊、柳琪、赵玉华。DB37/T2617—20141饲料中黄曲霉毒素B1的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了饲料中黄曲霉毒素B1的高效液相色谱检测法。本标准适用于饲料中黄曲霉毒素B1的测定。本方法检测限为5µg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法3原理样品中黄曲霉毒素经溶液提取，黄曲霉毒素免疫亲和柱净化，供高效液相色谱（带荧光检测器）测定。4试剂与材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。本标准所述溶液如未指明溶剂，均指水溶液。4.1水，GB/T6682，一级。4.2甲醇：色谱纯。4.3乙腈：色谱纯。4.4氯化钠。4.5甲醇+水（7+3）溶液：取70mL甲醇加30mL水。4.6柱后衍生液（0.05%碘溶液）：称0.1g碘，溶解于20mL甲醇，加水定容至200mL，过0.45µm滤膜，4℃避光保存。4.7黄曲霉毒素B1标准品：纯度≥99%。4.8黄曲霉毒素B1标准储备液：用甲醇配制成1µg/mL的标准储备液，于-4℃保存。4.9黄曲霉毒素B1标准工作液：准确移取适量储备液，用甲醇稀释成一系列标准工作液，现用现配。4.10免疫亲和柱：免疫亲和柱应含有黄曲霉毒素B1的抗体。亲和柱的最大容量不小于100ng黄曲霉毒素B1。4.11滤膜：0.45µm滤膜。5仪器与设备5.1高效液相色谱仪，带荧光检测器和柱后衍生系统。DB37/T2617—201425.2天平：感量0.01g。5.3高速均质机。5.4玻璃纤维滤纸。5.5漩涡混合器。5.6三角瓶：200mL。5.7玻璃注射器：10.0mL。5.8空气压力泵。5.9玻璃试管：直径12mm，长75mm，无荧光特征。6试样的制备将饲料样品用粉碎机粉碎，过0.85mm筛。7测定步骤7.1提取称取15g（准确至0.01g）样品于200mL三角瓶（5.6）中，加入5g氯化纳（4.3），再加入甲醇+水溶液（4.4）75mL，用均质机高速搅拌提取1min，定量滤纸过滤。准确移取10.0mL滤液，再加入20.0mL水稀释，摇匀，...
