DB41河南省地方标准DB41/T708—2011规模牛场口蹄疫监测技术规范2011-12-20发布2011-12-20实施河南省质量技术监督局发布河南省地方标准公共服务平台DB41/T708—2011I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由河南省畜牧局提出并归口。本标准由河南省动物疫病预防控制中心负责起草，中国动物疫病预防控制中心参加起草。本标准主要起草人：张志凌、王功民、吴志明、张健、闫若潜、方先珍、谢彩华。河南省地方标准公共服务平台DB41/T708—20111规模牛场口蹄疫监测技术规范1范围本标准规定了规模牛场口蹄疫监测样品的采集和保存、监测方法和方式、监测结果的处理。本标准适用于规模牛场口蹄疫监测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18935－2003口蹄疫诊断技术中华人民共和国农业部《口蹄疫防治技术规范》中华人民共和国农业部公告第503号《高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范》3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1酶联免疫吸附试验（ELISA）一种酶联免疫技术。用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体，并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。4样品的采集和保存要求4.1样品的采集和保存4.1.1组织样品4.1.1.1样品的选择用于病毒分离、鉴定的样品应选择牛未破裂的舌面或蹄部、鼻镜、乳头等部位的水疱皮和水疱液。对临床健康但怀疑带毒的牛可在扑杀后采集淋巴结、脊髓、肌肉等组织样品作为检测材料。4.1.1.2样品的采集和保存4.1.1.2.1水疱样品采集部位可用清水清洗，不应使用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。河南省地方标准公共服务平台DB41/T708—201124.1.1.2.2未破裂水疱中的水疱液用灭菌注射器采集不少于1mL，装入灭菌小瓶中，加抗菌素（青霉素终浓度为10000IU·mL-1,链霉素终浓度为10mg·mL-1），加盖密封并用胶带封口，及时冷冻保存。4.1.1.2.3剪取新鲜水疱皮3g～5g放入灭菌小瓶中，加2倍体积的50％甘油/磷酸盐缓冲液(pH7.4),加盖密封并用胶带封口，冷冻保存。4.1.1.2.4在无法采集水疱液和水疱皮时，应采集淋巴结、脊髓、肌肉等组织样品3g～5g装入灭菌的小瓶内,加盖密封并用胶带封口，冷冻保存。4.1.1.2.5每份样品的包装...
