ICS65.020.30CCSB4115内蒙古自治区地方标准DB15/T2741—2022间接ELISA方法检测羊溶血性曼氏杆菌抗体IndirectELISAfordetectionofantibodyofsheepmannheimiahaemolytica2022-07-29发布2022-08-29实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T2741—2022I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区农牧业科学院提出。本文件由内蒙古畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本文件主要起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。本文件主要起草人：张月梅、赵世华、宋越、白帆、王娜、戴伶俐、张帆、杨斌、刘威。DB15/T2741—20221间接ELISA方法检测羊溶血性曼氏杆菌抗体1范围本文件规定了应用间接ELISA检测羊溶血性曼氏杆菌抗体的方法。本文件适用于羊溶血性曼氏杆菌PlpE蛋白抗体检测。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。酶联免疫吸附试验enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA以固相载体吸附技术和免疫酶技术相结合建立的一种检测方法，通常在合适的载体上，酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原-抗体复合物，在一定底物参与下，复合物上的酶催化底物，使其水解、氧化或还原成另一种带色物质，酶的降解底物和呈现色泽成正比，可以使用酶标仪进行测定，从而计算出参与反应的抗原或抗体的种类和含量。辣根过氧化物酶horseradishperoxidase，HRP与碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，AKP）常被用于免疫酶技术中的抗体或抗抗体的标记，而形成仍保持免疫学活性和酶活性的酶标记物，进而催化底物产生水解、氧化或还原反应，最终生成可溶或不可溶有色物质。溶血性曼氏杆菌mannheimiahaemolytica，Mh巴氏杆菌科曼氏杆菌属的微生物，球杆状或短杆状菌，两端钝圆，革兰染色阴性，典型两端深染，中间浅，单个或成双存在，无鞭毛，有荚膜，不形成芽孢。3,3’,5,5’-四甲基联苯胺tetramethylbenzidine，TMB用于酶联免疫吸附试验（ELISA）的可视化试剂。其可在辣根过氧化物酶（HRP）的催化下发生颜色变化。DB15/T2741—20222异丙基-β-D-硫代半乳糖苷isopropyl-β-d-thiogalactoside，IPTG一种作用极强的诱导剂，它可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。吐温-20tween-20一种非离子型表面活性剂。卡那霉素kanamycin一种蛋白质生物合成抑制剂，从卡那霉素链霉菌（Streptomyceskanamyceticus）中分离得到。吸...
