ICS11.220CCSB4115内蒙古自治区地方标准DB15/T2907—2023溶血性曼氏杆菌病诊断技术规范Technicalspecificationforthediagnosisofmannheimiahaemolytica2023-03-10发布2023-04-10实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T2907—2023I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC19)归口。本文件起草单位:内蒙古大学、内蒙古蒙微生物科技有限公司、金宇保灵生物药品有限公司。本文件主要起草人:王炜、王岩、赵丽霞、韩四娥、孟凯、胡薇。DB15/T2907—20231溶血性曼氏杆菌病诊断技术规范1范围本文件规定了溶血性曼氏杆菌病的临床诊断、细菌分离与鉴定、PCR检测和间接ELISA抗体检测等诊断技术要求。本文件适用于牛、羊饲养场(户)和动物疫病检疫、诊疗单位对牛、羊临床样本和分离培养物中溶血性曼氏杆菌的检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法GB/T14926.43-2001实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4缩略语下列缩略语适用于本文件。Mh:溶血性曼氏杆菌(Mannheimiahaemolytica)LKTA:白细胞毒素蛋白A(LeukotoxinA)PCR:聚合酶链式反应(Polymerasechainreaction)DNA:脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleicacid)bp:碱基对(Basepair)dNTPs:脱氧核糖核苷三磷酸(Deoxyribonucleosidetriphosphates)Taq酶:TaqDNA聚合酶(TaqDNApolymerase)TSB:胰蛋白胨大豆肉汤(Trypticsoybroth)PBS:磷酸盐缓冲液(Phosphatebuffersolution)ELISA:酶联免疫吸附试验(Enzymelinkedimmunosorbentassay)5临床诊断流行病学由溶血性曼氏杆菌引起的牛、羊呼吸道疾病,一年四季均可发生,秋冬季多见。DB15/T2907—20232临床症状发病牛、羊主要临床症状表现为咳嗽、呼吸困难、流涕,并伴有体温升高40℃~42℃、精神沉郁、厌食等。发病初期动物呼吸速率加快,继而出现严重的呼吸困难,呼吸伴有啰音。病理变化临床病理变化以纤维素性渗出性肺炎、大叶性肺炎和胸膜肺炎为主。病理剖检可见:病变肺呈肉样变、质地坚实、肺水肿、间质增宽、胸腔脏层和壁层均有纤维素附着、胸腔积液呈黄...