DB15T 1584-2019 牧草中饱和链烷烃测定 气相色谱法.pdf

ICS 65.120 B 46 DB15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 15842019 牧草中饱和链烷烃测定 气相色谱法 The Method of Determination of Saturated Alkane Using Nalkane in Forage Samples by Gas Chromatography 2019-01-18 发布 2019-04-18 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 15842019 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。本标准由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本标准起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。本标准主要起草人：孙海洲、任晓萍、金鹿、桑丹、李胜利、张春华、张崇志、珊丹、凌树礼、闫新刚。DB15/T 15842019 1 牧草中饱和链烷烃测定 气相色谱法 1 范围 本标准规定了应用气相色谱法测定牧草中饱和链烷烃的方法。本标准适用于牧草中饱和链烷烃含量的测定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 3358.1 统计学词汇及符号 第1部分：一般统计术语与用于概率的术语 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料 采样 3 原理 利用碱性物质，处理掉样品中的脂肪部分及非链烷烃部分，然后添加有机溶剂进行萃取，得到链烷烃部分。4 试剂 除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T 6682的规定。4.1 98.5%正庚烷。4.2 99.7%无水乙醇。4.3 85%氢氧化钾。4.4 99.5%正二十七烷烃（C27）。4.5 98%正二十九烷烃（C29）。4.6 99%正三十烷烃（C30）。4.7 98%正三十一烷烃（C31）。4.8 98.9%正三十二烷烃（C32）。4.9 正三十三烷烃（C33）。4.10 99.9%正三十四烷烃（C34）。DB15/T 15842019 2 4.11 正三十五烷烃（C35）。4.12 正三十六烷烃（C36）。4.13 99.5%正三十七烷烃（C37）。4.14 链烷烃标准 4.14.1 链烷烃标准贮备液 准确称取链烷烃标准品4.5 mg，置于10 mL的容量瓶中，用庚烷溶解，定容，其浓度为0.45 mg/mL，置于4冰箱中密封保存。4.14.2 链烷烃标准工作液 分别准确吸取一定量的标准贮备液（4.14.1），用庚烷稀释成浓度不同浓度的标准工作液。其中，C27的工作液浓度分别为 0.11 mg/mL、0.22 mg/mL、0.44 mg/mL、0.86 mg/mL、1.72 mg/mL；C29的工作液浓度分别为 0.11 mg/mL、0.21 mg/mL、0.42 mg/mL、0.84 mg/mL、1.68 mg/mL；C30的工作液浓度分别为 0.10 mg/mL、0.21 mg/mL、0.40 mg/mL、0.82 mg/mL、1.64 mg/mL；C31 和 C32的工作液浓度分别为 0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.80 mg/mL、1.60 mg/mL、3.20 mg/mL；C33的工作液浓度分别为 0.10 mg/mL、0.21 mg/mL、0.41 mg/mL、0.82 mg/mL、1.64 mg/mL；C34的工作液浓度分别为 0.11 mg/mL、0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.80 mg/mL、1.60 mg/mL；C35的工作液浓度分别为 0.10 mg/mL、0.22 mg/mL、0.43 mg/mL、0.86 mg/mL、1.72 mg/mL；C36和C37的工作液浓度分别为0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.80 mg/mL、1.60 mg/mL、3.20 mg/mL。5 仪器和设备 5.1 实验室用样品粉碎机或研钵。5.2 分析天平（分度值 0.0001g）。5.3 干燥箱。5.4 气相色谱仪。5.5 数显水浴摇床。6 试样制备 采样按照GB/T 14699.1制备，置于干燥箱内于 65烘干，粉碎或研磨后过 1 mm筛，混匀，装入密闭容器中，保存备用。7 分析步骤 7.1 试验溶液的制备 准确称取 100 mg 干燥样品，放入 10 mL具塞试管中。添加 1.5 mL 的 1 mmol/L 醇化氢氧化钾，盖好试管后在数显温控水浴摇床中90加热16 h。然后局部降温到5060后，添加1.5 mL的1 mg/mL的庚烷内标溶液于具塞试管中，慢速摇动。继续加入0.4 mL蒸馏水后盖好瓶塞剧烈震荡，再放入50DB15/T 15842019 3 60的水浴锅中。待样品分层后用聚乙烯巴斯德吸管移取上层部分到小瓶中。继续添加1.5 mL的1 mg/mL庚烷内标溶液到具塞试管中重新萃取，移取上层部分到同一个小瓶中。充分摇匀两次的萃取液。使用注射器的注射筒，用少量玻璃棉将底层铺平，倒入大约1 cm 高度的硅胶（80目230目），制成硅胶层析柱。用1 mL庚烷溶液对层析柱进行淋洗激活，利用硅胶层析柱过滤萃取液。然后取4 mL洗脱烷烃用0.45m微孔有机膜过滤作为试样溶液，供气相色谱分析备用。7.2 测定 7.2.1 色谱条件 柱型：TG-1MS（规格：30 m*0.25 mm，膜厚：0.25m）。检测器：FID(氢火焰离子检测器)。载气：高纯度氮气。总压力：160 kpa。总流量：46.4 mL/min。柱流量：1.06 mL/min。线速度：35.2 cm/sec。分流比：40:1。吹扫流量：3.0 mL/min。循环流量：30.0 mL/min。H2流量：40.0 mL/min。空气流量：400 mL/min。7.2.2 定量测定 取1 mL2 mL试样制备液和相应浓度的标准工作液，作多点校准，以色谱峰面积积分值定量。8 测定结果的计算 8.1 试样中链烷烃的含量以质量分数表示，按式（1）计算。X=m1/（mn）（1）式中：X试样中链烷烃的含量，单位为mg/kg；m1试样色谱峰对应的链烷烃质量，单位为g；m试样质量，单位为mg；n稀释倍数。8.2 结果表示 取两次测定的算数平均值作为结果，保留一位小数。8.3 重复性 每试样称取两个平行样进行测定，取平均值为分析结果。根据GB/T 3358.1，在相同条件下同一样品获得的测定结果的偏差不得超过算术平均值的10%。_