ICS01.CCSA0安畜禽2021-012000徽禽血清Determin01-25发布徽清中黄定nationofA布安省黄曲霉定高AFB1biomchrom安徽省市场地霉毒素高效液markerinmatograph场监督管理方素B1生液相色serumhhicmethod理局发方DB生物标谱法highperfod发布34标B34/T386标志物ormanceli2021-4准61—2021物的测quid-02-25实准测实施DB34/T3861—2021I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽农业大学提出。本文件由安徽省农业标准化技术委员会归口。本文件起草单位:安徽农业大学、安徽浩翔农牧有限公司(农业农村部猪肉质量安全控制重点实验室)、望江县小月山农业发展有限公司、和县农业农村局、望江县畜牧兽医局、安徽省动物疫病预防与控制中心、安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、宿松县春润食品有限公司。本文件主要起草人:王希春、杨长根、陈祥国、赵家喜、沈艳、高亚飞、王军、汤继顺、赵杰、吴金节、李玉、冯士彬、孙裴、涂健、冯江华。DB34/T3861—20211畜禽血清中黄曲霉毒素B1生物标志物的测定高效液相色谱法1范围本文件确立了畜禽血清中黄曲霉毒素B1生物标志物含量的高效液相色谱法测定方法,并规定了测定原理、试剂和设备、测定步骤、测定结果的表述、重复性、检出限与定量限、回收率。本文件适用于畜禽血清中AFB1生物标志物的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1黄曲霉毒素B1AflatoxinB1,AFB1主要由黄曲霉与寄生曲霉代谢产生的一种真菌毒素,进入体内以后会与血液白蛋白中的赖氨酸(Lysine)结合形成稳定的生物标志物AFB1-Lysine。4原理通过蛋白酶的消化,从血清白蛋白中释放出AFB1生物标志物,采用固相萃取柱浓缩。浓缩的AFB1生物标志物经高效液相色谱仪分离,用荧光检测器检测。5试剂和设备5.1试剂与材料5.1.1甲醇(CH3OH):色谱纯。5.1.2蛋白酶。5.1.3磷酸二氢铵(NH4H2PO4),分析纯。5.1.4叠氮化钠(NaN3),分析纯。5.1.5白蛋白试剂(DMA):生物试剂。5.1.6蛋白检测染料试剂浓缩液(考马斯亮蓝G-250)5.1.7氯化钠(NaCl),分析纯。...