DBS53云南省食品安全地方标准DBS53/016—2013食品中展青霉素的测定液相色谱-串联质谱法2013-10-20发布2014-04-20实施云南省卫生厅发布DB53/016—2013前言本标准为首次发布。IDB53/016—2013食品中展青霉素的测定液相色谱-串联质谱法1范围本标准适用于食品（果汁饮料、果酒、果酱、果干及薯类制品等）中展青霉素的测定和确证。2规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。3原理澄清液体样品（果酒样品需出去乙醇）直接固相萃取净化；混浊液体样品和固体样品先用果胶酶水解，再以乙酸乙酯提取，吹干浓缩后固相萃取净化，液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。4试剂除另有说明外，所用试剂均为分析纯，试验用水为GB/T6682规定的一级水。4.1乙腈（色谱纯）。4.2甲醇（色谱纯）。4.3冰乙酸。4.4乙酸乙酯（色谱纯）。4.5果胶酶溶液：活度不低于1300U/mL（果胶酶固体则需按活度配制为溶液）。4.60.2%乙酸溶液：量取2mL冰乙酸以水定容于1000mL容量瓶。4.7展青霉素标准品（patulin）：CAS编号149-29-1，纯度大于99.0%。4.8展青霉素标准储备溶液：准确称取适量的展青霉素标准品，用乙酸乙酯配成200µg/mL的标准储备溶液，避光于-18℃下保存，稳定期1个月。4.9展青霉素标准中间溶液：准确移取适量的展青霉素标准储备溶液，用氮气吹干后，用0.2%乙酸（4.7）配成2µg/mL的标准中间溶液，避光于4℃下保存，即用即配。4.10标准工作溶液：以相应的空白样品为基质，加入相应浓度的标准中间液，配制成1.0µg/L、5.0µg/L、10.0µg/L、50.0µg/L、100.0µg/L标准溶液，同样品一同进行前处理及上机检测，并绘制标准曲线。4.11固相萃取小柱：OsaisHLB或相当者，3mL/60mg。使用前对固相萃取柱依次加入3mL水、3mL甲醇和3mL水活化，流速控制在每秒2滴~3滴。5仪器5.1液相色谱串联四级杆质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。5.2电子天平：感量0.1mg，感量0.01g。1DB53/016—20135.3漩涡混匀器。5.4高速离心机。5.5搅拌式均质机。5.6氮气吹干仪。5.7恒温空气浴（水浴）振荡器。6分析步骤6.1试样处理6.1.1澄清液体样品取2g试样（精确到0.01g）于已活化的固相萃取柱上，用2mL乙酸溶液（4.6）淋洗，流速为每秒1滴，抽真空3min~5min，然后加入乙酸乙酯（4.4）溶液洗脱，收集洗脱液于氮气下常温吹干，用1mL乙酸溶液（4.6）溶解定容，...
