DBS53云南省食品安全地方标准DBS53/015—2013食品中富马酸二甲酯的测定高效液相色谱法2013-10-20发布2014-04-20实施云南省卫生厅发布DB53/015—2013前言本标准为首次发布。IDB53/015—2013食品中富马酸二甲酯的测定高效液相色谱法1范围本标准适用于食品中富马酸二甲酯（霉克星）含量的测定。2规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。3原理富马酸二甲酯（DMF）为白色片状或粉末状结晶，对热不稳定，易升华。微溶于水，易溶于乙酸乙酯、氯仿和醇类。样品用甲醇萃取、沉淀、净化后，注入高效液相色谱柱，以保留时间定性、峰面积定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇。4.2甲醇：色谱纯。4.3乙酸铵。4.4四丁基溴化铵。4.5富马酸二甲酯标准储备液：准确称取富马酸二甲酯1.000g（以100%纯度计），用甲醇（4.1）溶解并定容于100ml容量瓶中，配成浓度为10mg/ml的标准储备液。4.6富马酸二甲酯标准工作液：用甲醇（4.1）把标准储备液按比例逐级稀释后配成浓度为0µg/ml、5µg/ml、10µg/ml、15µg/ml、20µg/ml、25µg/ml的标准工作液。4.7乙酸铵溶液（0.02mol/L，含0.008mol/L四丁基溴化铵）：称取1.54g乙酸铵（4.3）、2.60g四丁基溴化铵（4.4）以适量水溶解后，加水至1000mL。过0.45µm滤膜。4.8微孔滤膜：0.45µm有机系滤膜。5仪器和设备5.1LC-10A液相色谱仪（带紫外检测器或二极管阵列检测器）。5.2天平（感量0.01g和0.0001g）。5.3超声波振荡器。6分析步骤1DB53/015—20136.1试样处理6.1.1液体样品：准确称取混合均匀的样品10.0g于50mL具塞比色管中，加入10mL甲醇（4.1），用超声波（5.3）萃取20分钟，冷却后用甲醇（4.1）定容于25ml，混匀、沉淀，上清液过0.45µm有机系滤膜过滤（4.8）。6.1.2固体、半固体样品：准确称取制备均匀的样品5.0g于50mL具塞比色管中，加入10mL甲醇（4.1），用超声波（5.3）萃取20分钟后冷却至室温后再超声20分钟，冷却后用甲醇（4.1）定容于25ml，混匀、沉淀，上清液过0.45µm有机系滤膜过滤（4.8）。6.2测定6.2.1HPLC参考条件a)色谱柱：ODS-C18，150mm×4.6mm,5µm,或具有同性能的色谱柱；b)流动相：乙酸铵（4.7）-甲醇（4.2）＝70：30；c)流速：1mL/min；d)检测波长：230nm。6.2.2富马酸二甲酯标准曲线绘制配制浓度...
