ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DBS45广西壮族自治区地方标准DBS45/023—20154食品安全地方标准水牛乳及其制品中掺入牛属乳的定性检测PCR法（报批稿）（20142015-－XX03-－XX05发布20142015-－XX04-－XX05实施广西壮族自治区卫生和计划生育委员发布DBS45/023—20154前言本标准按照GB/T1.1－2009的格式编写。本标准由广西壮族自治区卫生和计划生育委员会提出。本标准起草单位：广西壮族自治区水牛研究所、广西壮族自治区分析测试研究中心。本标准起草人：曾庆坤、林波、黎颖、李玲、卢安根、杜寒春、巫坚、黎德全、黄丽、刘永强。IDBS45/023—20154水牛乳及其制品中掺入牛属乳的定性检测PCR法1范围本标准适用于水牛乳及其制品中掺入牛属乳的PCR定性检测。.............................2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T19495.2-—2004转基因产品检测实验室技术要求GB/T6682—-2008分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义3.13.1水牛乳水牛属动物（Bubalusbubalis）乳腺分泌产生的乳白色液体物质。3.23.2牛属乳牛属动物（Bostaurus），包括荷斯坦和娟姗牛乳腺分泌产生的乳白色液体物质及其制品。3.33.3水牛乳制品以生水牛乳为原料，经过相应工艺加工制成的液态乳、发酵乳和干酪等各种产品的总称。3.43.4PCR(聚合酶链反应)聚合酶链反应（polymerasechainreaction,PCR）是一种在体外快速扩增特定基因或DNA片段的方法。由“热变性→复性→延伸”三步反应组成一个PCR循环，经过多次循环反应，使目标DNA得以大量扩增。3.53.5特异性引物针对特定模板DNA片段设计的两段与模板两端分别互补的一对寡核苷酸序列，在PCR反应中与模板DNA两端分别特异性结合。3.63.61DBS45/023—20154阳性掺入对照从生水牛乳与生牛属乳比例为1：：1的混合乳中按照6.1.1的操作提取得到的总DNA，按照6.3的PCR程序扩增后，经电泳检测会在220bp和346bp位置各出现一条电泳条带。3.73.7阴性掺入对照从生水牛乳中按照6..1..1的操作提取得到的总DNA，按照6.3的PCR程序扩增后，电泳检测仅在220bp位置出现一条电泳条带。3.83.8阴性质控对照在PCR扩增时，用双蒸水代替模板，其它操作相同。4方法原理采用DNA提取试剂或试剂盒，提取样品中的DNA，以提取的DNA为模板进行PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，对比DNA标...
